AC16细胞（人心肌细胞）

AC16细胞系是通过将成年人心室心肌组织的原代细胞与SV40转化的尿苷营养缺陷型人成纤维细胞融合得到。为了确保细胞系的纯度，融合后的细胞在无尿苷培养基中培养，以去除未融合的成纤维细胞，并对存活的融合细胞进行亚克隆筛选。AC16细胞在培养过程中，可以通过调控培养条件和抑制SV40大T抗原的表达，来调控其增殖和分化。

AC16细胞特性

基因表达：AC16细胞能够表达心脏特异性标记物，包括β-肌球蛋白重链（βMHC）和连接蛋白43（CX-43）。
SV40大T抗原：细胞含有SV40大T抗原（T-Ag），与永生化相关。沉默SV40 T-Ag的表达可调控AC16细胞的增殖和分化。
线粒体DNA：AC16细胞系不含线粒体DNA。

AC16细胞参数表

细胞名称	AC16细胞（人心肌细胞）
细胞别称	AC-16;
来源	成人心室心肌组织的原代细胞与SV40转化的人成纤维细胞融合
细胞形态	成纤维细胞、上皮细胞样
细胞类型	杂交细胞
生长特性	贴壁细胞
收录	ATCC
生物安全等级	2
致瘤性	否
培养基	DMEM + 10% FBS + 1% P/S
培养环境	37°C，5% CO₂，饱和湿度
换液周期	每2-3天更换一次
传代比例	1:2-1:4（根据细胞生长速度及密度决定）
冻存液配方	92% FBS + 8% DMSO
冻存规格	200-300万/ml，1ml每管
SV40大T抗原	存在，影响细胞的永生化
心脏特异性标记物	β-肌球蛋白重链（βMHC）、连接蛋白43（CX-43）
线粒体DNA	不含
研究用途	心脏正常发育及病理状态下的基因表达和功能研究
适用领域	心脏生物学、药物筛选、疾病模型研究

培养教程

AC16人心肌细胞培养教程

传代步骤

传代比例：根据AC16细胞的生长状态和密度，建议以1:2至1:4的比例进行传代。
吸除原有的AC16细胞培养基。
用3-4 ml的常温PBS轻轻冲洗细胞层10-20秒，然后吸走PBS。
加入1 ml胰酶，轻轻晃动培养瓶，使胰酶均匀覆盖AC16细胞层。
将培养瓶放入37°C培养箱，监控AC16细胞的消化进度。当细胞间隙变大但尚未完全脱落时，加入2-3 ml完全培养基终止消化。
将细胞悬液轻轻混匀，900 rpm离心3-5分钟，弃去上清。
重新悬浮AC16细胞于新鲜培养基中，然后均匀分配至新的培养瓶中。
补足培养基后，将培养瓶放回培养箱中继续培养。

细胞冻存

冻存细胞密度：200-300万AC16细胞/ml，每管1 ml。
消化AC16细胞并离心后，弃去上清，加入预先配制好的冻存液，轻轻重悬细胞。
将AC16细胞悬液迅速移入标记好的冻存管中。
将冻存管放入程序降温盒中，置于-80°C冰箱过夜，第二天转移至液氮罐中长期保存。
如果没有程序降温盒，可以将冻存管先放入泡沫盒中，在4°C环境下静置5-10分钟后，再放入-80°C冰箱。

注意事项

胰酶消化AC16细胞的时间因细胞状态而异，需密切观察并严格控制消化时间。
在吹打AC16细胞时要轻柔，避免产生气泡，防止影响细胞状态和活性。