来源：肺；转移灶：肋膜渗出癌；小细胞肺癌
细胞特征：半贴半悬 , 上皮细胞样
培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
其他：ncih446细胞原始形态并不完全具有典型的小细胞肺癌特征
NCI-H446细胞株是从一位61岁白人男性小细胞肺癌患者的胸腔积液（胸水）中分离得到的人类肿瘤细胞系。
NCI-H446细胞的原始形态并不完全具有典型的小细胞肺癌特征，被认为是小细胞肺癌的生化和形态学变种。
NCI-H446细胞系这是一种超三倍体人类细胞系。模式染色体数目为74，发生率为22%，多倍体为2.5%。大多数细胞共有超过25个标记，包括inv（1）（p32q21）、der（1）t（1:4）（q42；q11）、i（5q）、t（2p13q）和der（19）t（7；HSR；19）（q11；HSR，p13.3）。结构正常的N1和N13缺失，正常的N4、N5和N10大多为每个细胞的单拷贝。每个细胞有两对X/Y。
NCI-H446细胞具有以下特性和特征
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分子特征：表达神经元特有的烯醇酶、表达脑型肌酸激酶同工酶、左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素和胃泌激素释放肽的表达未达到可检测水平
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基因特征：C-myc基因显著扩增：DNA序列扩增约20倍；C-myc RNA表达：比正常细胞增加15倍；
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生长特性：半贴壁半悬浮生长、形态类似上皮细胞；
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致瘤性：在裸鼠中可形成移植性肿瘤，但肿瘤组织学特征与典型小细胞肺癌不同
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生化特性：被认为是小细胞肺癌的生化和形态学变种
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培养特性：对培养条件敏感，特别是对温度和CO2浓度的变化；贴壁时间较长，处理后24小时内尽量不要移动
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形态特征：原始形态并不完全具有典型的小细胞肺癌特征
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转移特性：显示胸腔积液转移性
ncih446细胞参数表
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细胞名称
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ncih446细胞（人小细胞肺癌细胞）
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细胞别称
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NCI-H446 ；H446; H-446; NCI-446; NCIH446
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细胞来源
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61岁白人男性小细胞肺癌患者的胸腔积液
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细胞类型
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人小细胞肺癌细胞
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细胞形态
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上皮细胞样，类似淋巴母细胞
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生长特性
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半贴壁半悬浮
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安全等级
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BSL1
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染色体特征
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模式染色体数为74（超三倍体）；大多数细胞具有多种染色体标记
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基因特征
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C-myc DNA序列扩增约20倍；C-myc RNA表达比正常细胞增加15倍
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表达标志物
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神经元特有的烯醇酶，脑型肌酸激酶同工酶
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未检测到表达
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左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素、胃泌激素释放肽
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基础培养基和血清
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RPMI-1640，10% FBS
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培养添加剂
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10 nM氢化可的松, 0.005 mg/ml胰岛素, 0.01 mg/ml铁传递蛋白, 10 nM 17-beta-雌二醇, 30 nM亚硒酸钠
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培养环境
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37°C，5% CO2，pH 7.2-7.4
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细胞处理
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换液2~3次/周；传代比例1:3~1:9；贴壁时间较长，处理后24小时内尽量不要移动
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冻存方法
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完全培养基+5% DMSO，液氮保存
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致瘤性和转移性
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在裸鼠中可形成非典型小细胞肺癌的移植性肿瘤；显示胸腔积液转移性
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药物敏感性
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对多种化疗药物敏感，具体敏感性需进行实验验证
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研究用途
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小细胞肺癌研究，药物筛选，基因功能研究
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培养和形态特征
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对培养条件敏感；原始形态并不完全具有典型的小细胞肺癌特征
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生化特性
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被认为是小细胞肺癌的生化和形态学变种
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同工酶
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AK-1，；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，0；PGM1，1-2；PGM3，1
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保藏机构和编号
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ATCC，HTB-171
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细胞鉴定和检测
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建议定期进行STR分析确认细胞身份；定期进行支原体检测
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实验技术
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可进行转染（需特殊处理）；适用于药物筛选；可进行CRISPR/Cas9等基因编辑实验
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细胞密度和增殖
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建议保持在2-4 x 10^5 cells/ml；增殖较快，具体增殖率需实验测定
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研究应用
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可用于研究细胞凋亡机制、细胞周期调控机制和与小细胞肺癌相关的信号通路
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培养教程
ncih446人小细胞肺癌细胞培养教程
细胞复苏
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从液氮中取出NCI-H446细胞的冻存管，迅速置于37°C水浴中解冻。
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解冻后，将NCI-H446细胞悬液转移到预热的完全培养基中。
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以1000 rpm离心5分钟，弃上清。
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用新鲜完全培养基重悬NCI-H446细胞，转移到T25培养瓶中。
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置于37°C、5% CO2培养箱中培养。
细胞传代
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当NCI-H446细胞密度达到80%-90%时进行传代。
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收集NCI-H446细胞的悬浮部分到离心管中，轻轻润洗贴壁NCI-H446细胞1-2次。
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使用0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化贴壁NCI-H446细胞（T25瓶用1-2 mL），37°C消化1-2分钟。
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加入3-4 mL含10% FBS的培养基终止消化。
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以1:2到1:9的比例分装到新培养瓶中。
特别注意事项
细胞冻存
质量控制
STR鉴定及相关
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Amelogenin
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X,Y
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CSF1PO
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13,14
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D2S1338
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18,20
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D3S1358
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17
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D5S818
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11
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D7S820
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10,11
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D8S1179
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13,15
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D13S317
|
8
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D16S539
|
12
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D18S51
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12,13
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D19S433
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13,14
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D21S11
|
28
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FGA
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22
|
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Penta D
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12,13
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Penta E
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9,10
|
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TH01
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8,9.3
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TPOX
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9,11
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vWA
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18,19
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