DOHH2细胞系来源于一名患有难治性免疫母细胞型B细胞淋巴瘤的60岁男性患者，其原发病为滤泡性中心母细胞型/中心细胞淋巴瘤，后期病情进展为胸腔积液。DOHH2细胞系携带t(14;18)染色体易位，形成IGH-BCL2融合基因，并能够表达BCL2 mRNA。原始培养物是EBV-和EBV+细胞的混合物，其中EBV-细胞被分离并克隆扩增。外显子组和RNA序列数据可用（见参考18187和外显子序列和RNA-Seq）。

DOHH2细胞系为悬浮生长的淋巴母细胞样细胞，DOHH2细胞系常用于研究弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的病理机制。特别适合研究由于IGH-BCL2易位导致的BCL2基因过表达，这与DLBCL的抗凋亡特性密切相关。

DoHH2细胞系参数表

DoHH2人B细胞淋巴瘤细胞系培养教程

DoHH2细胞复苏

• 从液氮中取出DoHH2细胞冻存管，迅速在37℃水浴中解冻，期间轻轻摇动以加速解冻。

• 解冻完成后，将细胞悬液缓慢加入4 mL新鲜的完全培养基中，并轻轻混匀。

• 以1000 RPM离心4分钟，去除上清液，保留细胞沉淀。

• 用1-2 mL新鲜培养基重悬细胞，随后将DoHH2细胞悬液转移至培养瓶中。

• 将培养瓶放入37℃培养箱中，静置过夜，以便细胞适应生长环境。

日常维护与传代

• 换液频率：每2-3天进行一次换液。方法为轻轻吸去一部分旧培养基，补充新鲜培养基，确保DoHH2细胞始终处于健康的生长环境中。

• 传代操作：当DoHH2细胞密度达到80%-90%时，进行传代操作。

• 将细胞培养液轻轻吸出并离心沉淀细胞。

• 重悬DoHH2细胞于新鲜培养基中，按比例（1:2至1:6）分装到新的培养瓶中。

• 转入培养箱继续培养。

DoHH2细胞冻存

• 冻存培养基配方为90%完全培养基 + 10%二甲基亚砜（DMSO）。

• 将DoHH2细胞悬液分装至冻存管，逐步降低温度至-80°C，最后转移至液氮中长期保存。

• 按照前述复苏步骤操作，将DoHH2细胞快速解冻并重新培养。

注意事项

• 无菌操作：整个培养过程中需严格遵守无菌技术，防止细胞污染。操作时尽量使用无菌工具，定期检查培养环境及设备。

• 污染监控：每天观察DoHH2细胞形态和培养基的澄清度。如发现培养基浑浊或细胞形态异常，应及时采取措施处理。

• 健康监测：DoHH2细胞为悬浮生长细胞，定期监测细胞生长状态，避免细胞过度密集导致营养耗尽。此外，注意检查悬浮细胞的均匀性，确保细胞分布一致。