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产品名称:GM12878细胞(人B淋巴细胞)
产品详细说明
  • 来源:外周血
  • 细胞特征:悬浮生长,淋巴母细胞样
  • 培养基:1640+10% FBS+10% P/S
  • 其他:GM12878细胞经EB病毒转化获得,能够持续在体外增殖

GM12878细胞系是一株源自一位白人女性(NA12878)外周血的B淋巴细胞系,GM12878细胞经过Epstein-Barr病毒(EBV)的转化获得,EB病毒是一种常见的疱疹病毒,能够诱导B淋巴细胞转化为具有无限增殖能力的细胞,从而使其在体外维持生长。GM12878细胞表现出典型的淋巴母细胞形态,呈悬浮状态生长。GM12878细胞常用于基因组学、表观遗传学和免疫学等领域的研究。

GM12878细胞参数表

细胞名称 GM12878细胞(人B淋巴细胞)
别名 GM-12878
来源 一位白人女性的外周血B淋巴细胞
转化方法 Epstein-Barr病毒(EBV)转化
细胞类型 转化细胞
性别/年龄 女性
组织 外周血
疾病状态 常态
细胞形态特征 淋巴母细胞样,适合悬浮生长
培养基 RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 青霉素/链霉素(P/S)
培养条件 37°C,95%空气,5%二氧化碳
传代比例 1:2 至 1:4
生物安全等级 BSL-1
冻存条件 60%培养基、30%胎牛血清、10% DMSO,液氮保存
保藏机构 Coriell
应用领域 基因组学、表观遗传学、免疫学研究
供应限制 仅供科研使用
内毒素含量 <10 EU/mL
细胞特性 无菌操作,支原体检测阴性
注意事项 使用前需充分预热,保持无菌操作

培养教程

GM12878人B淋巴细胞培养教程

细胞复苏

  • 从液氮罐中取出冻存的GM12878细胞管,迅速置于37°C水浴中,轻轻摇晃直至细胞完全融化。

  • 将融化后的GM12878细胞悬液转移至含有10 mL预热完全培养基(RPMI-1640 + 10%胎牛血清(FBS)+ 1%青霉素/链霉素(P/S))的离心管中,混匀。

  • 将混合后的细胞悬液转移至T25培养瓶中。

  • 将培养瓶放入37°C、5% CO2培养箱中进行培养。

细胞传代

  • 每2-3天观察GM12878细胞的生长状态,当细胞达到80%汇合时进行传代。

  • 吸出培养瓶中的旧培养基,用预温的PBS轻轻冲洗细胞层1-2次。

  • 加入2-3 mL预温的胰酶-EDTA溶液,在37°C下孵育2-3分钟,使细胞脱离。

  • 加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打以使细胞悬浮。

  • 将细胞悬液转移至15 mL离心管中,1000 rpm离心5分钟。

  • 弃去上清,用5 mL完全培养基重悬细胞。

  • 按1:2或1:3的比例将细胞接种至新的T25培养瓶中。

  • 将新培养瓶置于37°C、5% CO2培养箱中继续培养。

细胞冻存

  • 收集对数生长期的GM12878细胞,离心后弃去上清。

  • 用冻存液(60% RPMI-1640 + 30% FBS + 10%二甲基亚砜(DMSO))重悬细胞,调整细胞密度为1-2×10^6 cells/mL。

  • 将细胞悬液分装至冻存管中,置于-80°C冰箱过夜。

  • 次日,将冻存管转入液氮罐中保存。

STR鉴定及相关

AMEL X/Y X
CSF1PO 12, 13
D13S317 11, 12
D16S539 9, 10
D18S51 15, 16
D19S433 14, 15
D21S11 29, 30
D3S1358 15, 17
D5S818 11, 12
D7S820 8, 9
FGA 22, 23
TH01 7, 9
TPOX 8, 9
VWA 16, 18
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