OCI-LY3细胞源自一名52岁男性患者的骨髓样本，患者在1983年被诊断为弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）并出现复发。OCI-LY3细胞为B细胞激活型，缺乏常见的t(8;14)染色体易位。OCI-LY3细胞形态为悬浮和贴壁混合生长的圆形细胞，常用于研究DLBCL的生物学特性及相关治疗策略，是研究弥漫性大B细胞淋巴瘤的重要模型。

OCI-LY3细胞特性特征

• OCI-LY3细胞EBV阴性

• 缺乏典型的t(8;14)易位

• OCI-LY3细胞对HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、MLV均呈阴性

OCI-LY3人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞参数表

OCI-LY3人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞培养教程

操作步骤

• 预热培养基: 在37°C水浴中预热5 mL IMDM完全培养基，为OCI-LY3细胞的复苏做准备。

• OCI-LY3细胞解冻: 从液氮中取出冻存的OCI-LY3细胞管，立即置于37°C水浴中快速解冻（1-2分钟），期间轻轻摇动以加速解冻。

• 离心分离: 将解冻后的OCI-LY3细胞悬液转移至15 mL离心管，加入4 mL预热的完全培养基，轻轻混匀。在1000 rpm下离心3分钟，弃去上清液。

• OCI-LY3细胞重悬: 用2 mL完全培养基轻轻重悬OCI-LY3细胞，确保细胞均匀分布。

• OCI-LY3细胞接种: 将重悬的OCI-LY3细胞转移至T25培养瓶，做好标记后，置于37°C、5% CO₂的培养箱中培养。

• 初步检查: 24小时后检查OCI-LY3细胞的贴壁和生长情况，适时更换新鲜的完全培养基，继续培养。

OCI-LY3细胞传代

• 监测OCI-LY3细胞密度: 当OCI-LY3细胞达到80%-90%汇合度时，准备进行传代。

• 洗涤OCI-LY3细胞: 吸弃旧培养基，加入1 mL无菌PBS轻轻润洗OCI-LY3细胞1-2次，去除残留的培养基和血清。

• 消化OCI-LY3细胞: 加入1 mL 0.25%胰酶-EDTA，使其完全覆盖OCI-LY3细胞表面，置于37°C培养箱中消化1-2分钟，观察OCI-LY3细胞是否变圆并开始脱落。

• 终止消化: 观察到OCI-LY3细胞脱落后，立即加入2-3 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀后转移至无菌离心管中。

• 离心处理: 在1000 rpm下离心5分钟，弃去上清液后，加入1-2 mL培养基重悬OCI-LY3细胞。

• 分装OCI-LY3细胞: 将OCI-LY3细胞悬液按1:2比例分装至新的培养瓶或培养皿中，加入8 mL新鲜培养基后，继续在培养箱中培养。

OCI-LY3细胞冻存

• 配制OCI-LY3细胞冻存液: 使用10% DMSO、40% FBS和50% IMDM完全培养基配制OCI-LY3细胞冻存液。

• 收集OCI-LY3细胞: 在传代后收集OCI-LY3细胞，离心后弃去上清液。

• 重悬OCI-LY3细胞: 用冻存液重悬OCI-LY3细胞，确保细胞充分均匀分散。

• 分装冻存: 将OCI-LY3细胞悬液分装入冻存管，做好标记。

• 缓慢降温: 将OCI-LY3细胞冻存管置于-80°C冰箱中逐步降温24小时，然后转移至液氮中长期保存。

注意事项

• 所有操作应在无菌条件下进行，建议在超净工作台内操作以防OCI-LY3细胞污染。

• 定期检查OCI-LY3细胞的形态和生长情况，确保其健康状态。

• 在胰酶处理时要尽量缩短OCI-LY3细胞暴露时间，以保持细胞的活力。