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产品名称:Kasumi-1细胞(人急性原粒细胞白血病细胞)
产品详细说明
  • 来源:急性髓系白血病
  • 细胞特征:悬浮细胞, 原粒细胞样
  • 培养基:1640+20% FBS+1% P/S
  • 其他:Kasumi-1细胞对多种细胞因子(如IL-3、IL-6、G-CSF等)有反应,但对IL-1和IL-5无反应

Kasumi-1细胞系源自一名7岁男性急性原粒细胞白血病(AML)患者的外周血。在体外增殖试验中,Kasumi-1细胞对IL-3、IL-6、G-CSF(粒细胞集落刺激因子)和GM-CSF(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)有反应,但对IL-1和IL-5无反应。即使在培养过程中分别加入二甲亚砜、G-CSF或IL-5,细胞也未显示出粒细胞或嗜酸性粒细胞的成熟迹象。相反,加入佛波酯可以诱导细胞向巨噬细胞样细胞分化。此外,1,25S-(OH)2-16,23-二烯-26-F3-10-或D3可以抑制其增殖。
Kasumi-1细胞可用于3D细胞培养、免疫系统紊乱和免疫学相关的研究。由于AML1-ETO融合基因的存在,kasumi-1细胞系成为研究白血病发病机制及潜在治疗策略的重要工具。

Kasumi-1细胞特性特征

  • 细胞形态:kasumi-1细胞呈原粒细胞形态,显示出髓性成熟的特征。

  • 生长特性:Kasumi-1细胞为悬浮生长,适合在液体培养基中繁殖。

  • 染色体特征:Kasumi-1细胞具有8号和21号染色体的易位,导致AML1基因与ETO(或MTG8)基因的融合,形成AML1-ETO融合基因(也称为AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)。

  • 融合蛋白:Kasumi-1细胞产生的嵌合AML1-ETO蛋白下调CEBPA mRNA和蛋白质的表达,抑制其DNA结合活性。这一过程对粒细胞的正常分化至关重要。

  • 髓过氧化物酶(MPO):Kasumi-1细胞对髓过氧化物酶呈阳性反应,表明其具有髓系细胞的特征。

Kasumi-1细胞参数表

细胞名称 Kasumi-1细胞(人急性原粒细胞白血病细胞)
别称 KASUMI-1; Kasumi1; KASUMI1; Kasumi1
种属来源
患者信息 7岁,男性
组织来源 外周血
细胞形态 原粒细胞
生长特性 悬浮生长
细胞代数 10代以内
生物安全等级 1
支原体检测
培养基 RPMI 1640 + 20% FBS + 1% P/S
冻存液 RPMI 1640 + 20% FBS + 10% DMSO
培养条件 37℃,5% CO₂
细胞密度 3×10^5到3×10^6细胞/ml
传代频率 每2-3天进行传代
传代比例 1:3到1:5
培养容器 T-25或T-75培养瓶
重要提示 收货时可能有部分死细胞和细胞碎片,轻轻吹开聚团即可
染色体特征 8号和21号染色体易位
融合基因 AML1-ETO融合基因
蛋白表达 嵌合AML1-ETO蛋白
髓过氧化物酶 阳性
研究应用 药物筛选、免疫系统研究、3D细胞培养、分子机制研究
诱导特性 加入佛波酯可诱导巨噬细胞样细胞
增殖抑制 沙利度胺和干扰素对细胞增殖的抑制作用
IC50值 沙利度胺:451.13 µg/ml(24h),362.50 µg/ml(48h)
细胞规格 1×10^6 cells/T25培养瓶或1 mL冻存管包装
背景描述 具有人急性淋巴白血病细胞的典型特征

培养教程

Kasumi-1人急性原粒细胞白血病细胞培养教程

传代方法

  • 传代频率:每2-3天对Kasumi1细胞进行一次传代。

  • 传代比例:推荐使用1:3到1:5的比例进行Kasumi1细胞的传代。

  • 轻轻吹打Kasumi1细胞悬液,确保Kasumi1细胞团块充分分散。

  • 取适量的Kasumi1细胞悬液转移至新的培养瓶中。

  • 加入适量新鲜培养基并充分混匀。

  • 将Kasumi1细胞置于培养箱中继续培养。

冻存方法

  • 细胞收集:在Kasumi1细胞处于对数生长期时收集。

  • 冻存液配置:使用10% DMSO、20% FBS与RPMI 1640培养基混合配制Kasumi1细胞的冻存液。

  • 以冻存液重悬Kasumi1细胞,将浓度调整至1×10^7细胞/ml。

  • 将Kasumi1细胞悬液分装到冻存管中,初步置于-80°C冰箱降温24小时,然后转移至液氮罐长期保存。

复苏方法

  • 快速解冻:将Kasumi1细胞冻存管从液氮罐中取出,立即置于37°C水浴中解冻,解冻时间控制在1分钟以内。

  • 细胞收集:解冻后的Kasumi1细胞立即离心,弃去上清。

  • 用预热的完全培养基重悬Kasumi1细胞。

  • 将Kasumi1细胞悬液接种到新的培养瓶中。

  • 置于培养箱中培养,24小时后更换培养基以去除解冻过程中的DMSO。

注意事项

  • 血清含量:Kasumi1细胞培养基中FBS的含量应严格保持在20%,不建议降低,以防影响Kasumi1细胞生长。

  • 生长速度:Kasumi1细胞生长较为缓慢,需要耐心。

  • 操作建议:减少Kasumi1细胞悬液的吹打和振荡,以防细胞损伤。

  • 环境稳定性:在Kasumi1细胞培养过程中尽量减少对培养瓶的移动和操作,以维持稳定的培养环境。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 10,12
D1S1656 14,16
D2S441 11,14
D2S1338 19
D3S1358 15,17
D5S818 9,11
D7S820 8,11
D8S1179 13,14
D10S1248 13,15
D12S391 20
D13S317 11,13
D16S539 9,12
D18S51 15,16
D19S433 13,15.2 (ATCC=CRL-2724; COG; Technion Genomics Center BCF; PubMed=20922763)
13,16 (DSMZ=ACC-220)
D21S11 30,31
D22S1045 17
FGA 22,24
Penta D 12
Penta E 11
TH01 6,9
TPOX 8,9
vWA 14 (ATCC=CRL-2724; CLS=300226; Cosmic-CLP=907275; DSMZ=ACC-220; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB1003; PubMed=20922763; PubMed=25877200)
14,18 (COG)
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