DB细胞系【弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系（dlbcl细胞）】

DB弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞（DLBCL细胞）是从一名45岁白人男性患者的腹水中分离出的B淋巴母细胞，广泛应用于免疫学研究。弥漫性大B细胞淋巴瘤（Diffuse Large B-cell Lymphoma, DLBCL）是起源于成熟B细胞的侵袭性肿瘤，是非霍奇金淋巴瘤中最常见的类型，占所有非霍奇金淋巴瘤的25%至50%。

DLBCL表现出快速增殖的特点，可能在淋巴结或其他器官（如脾脏、肝脏等）中形成肿瘤。随着年龄增长，特别是在60岁以上人群中，DLBCL的发病率显著上升。尽管这种疾病具有较强的侵袭性，但许多患者在接受适当治疗后可以实现治愈。
DLBCL显示出高度的异质性。根据2016年WHO的分类，DLBCL包含多个亚型，其中生发中心B细胞型（GCB）和活化B细胞型（ABC）最为常见。

DB细胞系（dlbcl细胞）特性特征

抗原表达：CD19+；CD20+；CD22+；Hle-1+；CD21-；CD25-
不表达的抗原：HLA-DR、HLA-DQ、IgM、IgD
T细胞抗原受体：DB细胞不属于T细胞。
基因表达：表达免疫球蛋白基因，表明其B细胞来源。
对爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）基因组呈阴性，DB细胞不受EBV感染影响。
暴露于激活蛋白激酶C的佛波酯（PMA或PdBu）会导致DB细胞严重的生长抑制，表明其对某些刺激的敏感性。
通过用BM细胞周期素治疗21天，DB细胞成功治愈了之前的支原体污染。

DB细胞系（dlbcl细胞）参数表

细胞名称	DB细胞系【弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系（dlbcl细胞）】
细胞类型	弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞（DB细胞）
来源	45岁白人男性患者腹水中分离的B淋巴母细胞
抗原表达	CD19+、CD20+、CD22+、Hle-1+、CD21-、CD25-
不表达的抗原	HLA-DR、HLA-DQ、IgM、IgD、T细胞抗原受体
基因表达	免疫球蛋白基因
基因表达	对EB病毒基因组的反应呈阴性
细胞形态	大细胞，通常比正常B细胞大，细胞核较大
培养基	RPMI-1640或其他适合B细胞的培养基
培养条件	37°C，5% CO₂，湿度控制
传代频率	每2-3天传代一次，依据细胞密度调整
细胞密度	通常维持在1×10^5至1×10^6细胞/mL
培养时间	通常为7-14天，依据实验需求
生长抑制	暴露于激活蛋白激酶C的佛波酯（PMA或PdBu）会导致严重的生长抑制
支原体污染	用BM细胞周期素治疗21天治愈之前的支原体污染
细胞周期	细胞周期调控基因表达，可能影响增殖能力
细胞凋亡	可能对凋亡信号通路敏感，影响细胞存活
临床特征	作为DLBCL的一种，通常表现为无痛性淋巴结肿大

培养教程

DB弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系培养教程

DB细胞复苏

从液氮罐中取出冻存的DB细胞管，迅速放入37°C水浴中，轻轻摇晃，直至DB细胞完全融化（约1-2分钟）。
将融化的DB细胞悬液转移至15 mL离心管中，加入9 mL预冷的RPMI-1640培养基，轻轻混匀。
以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

DB细胞重悬

将离心后的DB细胞沉淀重悬于5 mL RPMI-1640培养基中，并加入10% 胶牛血清和1% 青霉素-链霉素。
将重悬后的DB细胞转移至培养瓶中，密封后放入37°C、5% CO₂培养箱中进行培养。

DB细胞培养

每2-3天检查DB细胞状态，观察细胞的形态和生长情况。
当DB细胞密度达到1×10^6细胞/mL时，进行传代培养。
传代时，轻轻移除部分培养基，并加入新鲜的RPMI-1640培养基，以稀释DB细胞密度。

生长抑制实验

为研究DB细胞的生长抑制反应，可将其暴露于佛波酯（PMA或PdBu）中，观察DB细胞的生长抑制情况。

支原体污染处理

如果在培养过程中检测到DB细胞的支原体污染，可使用BM细胞周期素进行处理，通常需要21天的处理时间以彻底清除污染。

注意事项

无菌操作：所有操作均需在生物安全柜内进行，以确保无菌环境，防止DB细胞污染。
细胞密度：保持DB细胞在适宜的密度范围内，避免细胞过度拥挤或死亡，以维持细胞的健康状态。
培养基更换：定期更换DB细胞的培养基以去除代谢废物，提供新鲜的营养支持，一般每2-3天更换一次。
生长监测：定期观察DB细胞的形态，确保其保持正常形态特征，若发现异常，应立即采取措施。

培养时间和周期

培养时间：DB细胞通常在37°C、5% CO₂的条件下培养，培养时间一般为7-14天，具体时间根据实验需求和DB细胞的生长状态而定。
传代周期：当DB细胞密度达到1×10^6细胞/mL时，应及时进行传代培养。一般每2-3天检查一次DB细胞状态，并根据细胞密度决定是否传代。
细胞密度：在传代过程中，DB细胞应保持在1×10^5至1×10^6细胞/mL的浓度范围内，以确保细胞的健康生长。