35.1细胞（杂交瘤细胞抗CD2）

35.1杂交瘤细胞抗CD2是将经过佛波醇肉豆蔻酸（PMA）激活的人T淋巴细胞免疫获得的小鼠脾细胞与NSI/1骨髓瘤细胞融合而建立。35.1杂交瘤细胞能够持续产生特异性为IgG2a亚型的单克隆抗体，该抗体能够识别并结合人T细胞表面标志蛋白Tp50（CD2）。这些抗体在抑制T细胞增殖反应和细胞毒性方面有显著效果，但对抗体介导的细胞毒性反应没有抑制作用。

尽管35.1细胞来源于小鼠，但生成过程涉及人类免疫系统的细胞。具体步骤包括：使用PMA激活的人T淋巴细胞对小鼠进行免疫处理；从这些小鼠体内提取脾细胞；将这些脾细胞与gp2/O-Agl4骨髓瘤细胞融合，形成能够长时间生产目标抗体的杂交瘤细胞系。

35.1细胞特性特征

35.1细胞产生针对人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)的单克隆抗体、产生的抗体属于IgG2a亚型。
35.1细胞表达并分泌抗CD2单克隆抗体、产生的抗体能够与人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)特异性结合。
产生的抗体可以抑制T细胞增殖、细胞毒性反应。
产生的抗体不抑制抗体倡导的细胞毒反应。
35.1细胞含有产生抗CD2抗体的基因序列。
35.1杂交瘤细胞产生的抗体具有针对人CD2分子的高度特异性

35.1细胞（杂交瘤细胞抗CD2）参数表

细胞名称	35.1细胞（杂交瘤细胞抗CD2）
细胞别称	351细胞；35.1CD2;
来源	佛波醇肉豆寇酸(PMA)激活的人T淋巴细胞免疫获得的脾细胞与NSI/1骨髓瘤细胞融合
特征	淋巴瘤，淋巴母细胞样，悬浮生长
培养基	RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
培养条件	37℃, 95%空气 + 5% CO2
传代信息	比例1:2-1:4，每2-3天换液，周期24-48小时
细胞密度	3×10^5 - 5×10^5 cells/ml
冻存条件	60%基础培养基 + 30%FBS + 10%DMSO
保存方式	液氮储存
抗体类型	IgG2a亚型
抗体反应	与人T细胞表面蛋白Tp50(CD2)反应
抗体功能	抑制T细胞增殖反应和细胞毒反应，不抑制抗体倡导的细胞毒反应
质量检测	细菌、真菌、支原体检测均为阴性
免疫原	佛波醇肉豆寇酸(PMA)活化的人T淋巴细胞
融合细胞	小鼠脾细胞与gp2/O-Agl4骨髓瘤细胞
文献信息	Martin PJ, et al. J. Immunol. 131: 180-185, 1983. PubMed: 6190907

培养教程

35.1细胞（杂交瘤细胞抗CD2）培养教程

35.1细胞复苏

解冻：将冻存的35.1细胞管在37℃水浴中快速解冻，时间为1-2分钟。
转移和离心：将解冻的35.1细胞悬液转移到含5mL完全培养基的离心管中，以1000RPM离心5分钟，弃去上清。
重悬：用4-6mL完全培养基重悬35.1细胞。
培养：将35.1细胞悬液转移到培养瓶或6cm培养皿中，置于37℃、5% CO2培养箱中培养过夜。
次日处理：次日更换培养基，并检查35.1细胞密度和状态。

35.1细胞培养

培养基配方：完全培养基由90% RPMI-1640、10% FBS及1% P/S（青霉素/链霉素）组成。
培养条件：35.1细胞在37℃、95%空气+5% CO2的环境中培养。
细胞密度维持：保持35.1细胞密度在3×10^5 - 5×10^5 cells/ml之间。

35.1细胞换液

换液频率：每周进行2-3次换液。
直接补充：直接向培养瓶中加入新鲜的完全培养基。
离心换液：收集培养液，1000RPM离心5分钟，弃去上清后重悬35.1细胞于新鲜完全培养基中。

35.1细胞传代

传代时机：当35.1细胞密度达到80%-90%时进行传代。
传代比例：传代比例为1:2到1:5。
收集35.1细胞悬液，1000RPM离心8-10分钟。
弃去上清，用1-2mL新鲜完全培养基重悬35.1细胞。
按照传代比例将35.1细胞分配到新的培养瓶中，每瓶添加5-6mL完全培养基。

35.1细胞冻存

冻存液配方：55%基础培养基、40% FBS和5% DMSO。
细胞悬浮：将35.1细胞悬浮在冻存液中，每管约1×10^6细胞。
缓慢降温：使用程序降温盒或细胞冻存盒进行缓慢降温，最终将35.1细胞转移到液氮中长期保存。