J.gamma1人急性T细胞白血病细胞来源于患有急性T细胞白血病的男性患者的T细胞组织。J.gamma1细胞系是通过使用移码诱变剂ICR-191对野生型Jurkat细胞进行诱变，并分离出对渗透酸盐反应不能增加钙的克隆。在P98克隆上重复选择程序建立的J.gamma1细胞系。

J.gamma1人急性T细胞白血病细胞特性

• J.gamm1细胞系是Jurkat的E6-1克隆的磷脂酶C-gamma1（PLC-gamm1）缺陷突变体。

• J.gamma1.WT衍生物有与Jurkat细胞系相当的水平稳定表达PLC-gamma1。

• γ1亚系不含可检测的PLC-gamm1蛋白。γ1细胞中PLC-gamm1表达的缺乏导致T细胞受体（TCR）钙动员和活化T细胞核因子（NFAT）活化的严重缺陷。

• 通过用野生型PLC-gamm1表达载体转染P98细胞来逆转这些转录缺陷。

J.gamma1人急性T细胞白血病细胞参数表

J.gamma1 人急性T细胞白血病细胞

细胞传代

• 当J.gamma1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，首先弃去25cm²培养瓶中的培养液，使用PBS清洗细胞一次。

• 向培养瓶中加入约1ml 0.25%胰蛋白酶消化液，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化。轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，以1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清，沉淀的J.gamma1细胞用1-2ml完全培养基重悬，然后按1:2的比例进行分瓶传代。最后将传代好的细胞放入37℃、5%CO₂的细胞培养箱中培养。

细胞冻存

• 当J.gamma1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃去25cm²培养瓶中的培养液，使用PBS清洗细胞一次。

• 向培养瓶中加入约1ml 0.25%胰蛋白酶消化液，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，以1000rpm离心5分钟。

• 使用9:1的FBS比例混合冻存液，重悬J.gamma1细胞，并置于冻存管中。

• 首先将细胞冻存管放置于-20℃冷冻1.5小时，然后移入-80℃过夜。24小时后转入液氮中进行长期保存。可以使用程序降温盒直接放入-80℃。

细胞复苏

• 从液氮中取出J.gamma1细胞冻存管（注意佩戴防爆管面具），快速置于37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶。用75%的酒精擦拭冻存管外壁。

• 将冻存管中的J.gamma1细胞移至含6ml完全培养基的15ml离心管中，以1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清，沉淀用6ml完全培养基重悬J.gamma1细胞，接种到25cm²培养瓶中。将培养瓶放入37℃、5%CO₂的细胞培养箱中培养。