NCIH226细胞（人肺鳞癌细胞）

NCI-H226细胞系是一种源自男性肺部鳞状细胞癌患者（转移来自：胸腔积液）的上皮形态细胞，于1980年首次分离并建立。
NCIH226细胞模态数=47；范围=32-88；del（p25），是由AF Gazdar和JD Minna保存和推广。

NCIH226细胞参数表

细胞名称

NCIH226细胞（人肺鳞癌细胞）

别名

NCI.H226; NCI H226; H226; H-226; HUT-226; HUT 226; NCIH226

建立时间 / 性别

1980年 / 男性

组织来源

肺；源自转移部位：胸腔积液

细胞类型 / 形态

肿瘤细胞（肺鳞癌）/ 上皮细胞样

生长特性

贴壁生长

生物安全等级

1级

完全培养基配方

RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S

培养条件

37°C，95%空气 + 5%CO2，70%-80%湿度

传代比例

1:3 至 1:4

消化时间

2~3分钟

换液频次

2~3次/周

倍增时间

~60 hours

冻存液配方

方案1：90%血清 + 10% DMSO

方案2：55%基础培养基 + 40%FBS + 5%DMSO

储存温度

液氮

STR鉴定

已完成，结果正确

支原体检测

阴性

细胞活力 / 纯度

≥85% / ≥98%

消化酶 / 离心条件

0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA）/ 1200rpm/min，3分钟

首次传代建议

T25培养瓶1:2传代

运输方式

冻存细胞：干冰运输；活细胞：常温发货（T25瓶）

保存方式

短期：-80°C冰箱（过夜）；长期：液氮

水浴温度 / 离心条件

37°C / 1000RPM，3-5分钟

培养箱放置时间

2-3小时

观察密度和处理

<60%：更换培养基；70%-80%以上：可传代

培养教程

NCIH226人肺鳞癌细胞培养教程

细胞复苏

将冻存管在37°C水浴中快速解冻。
将 NCI-H226 细胞悬液转移到含有4-6mL完全培养基的离心管中。
以1000RPM离心3-5分钟，弃去上清液。
用适量完全培养基重悬细胞并转移到培养瓶中。

日常培养

每2-3天更换一次培养基。
观察 NCI-H226 细胞生长状态和培养基颜色变化。

细胞传代

当 NCI-H226 细胞密度达到80-90%时进行传代。
推荐传代比例为1:3至1:5。

传代步骤

吸出原培养液。
用2mL PBS轻轻润洗细胞，吸出PBS。
加入1mL 0.25% 胰蛋白酶溶液（含EDTA），37°C孵育2-3分钟，观察细胞变圆有间隙。
加入3mL 含血清的培养基终止消化。
吹打细胞使其脱壁并形成单细胞悬浮液。
以1200rpm离心3分钟，弃去上清液。
加入新鲜培养基重悬细胞，并按传代比例接种到新培养瓶中。

细胞冻存

冻存液配方: 80% 完全培养基 + 10% FBS + 10% DMSO。
将 NCI-H226 细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒或-80°C冰箱缓慢降温。
24小时后转移到液氮中长期保存。

STR鉴定及相关

Amelogenin	X,Y
CSF1PO	10,11
D2S441	14
D2S1338	25
D3S1358	16
D5S818	11,12
D6S1043	13,18
D7S820	8,10
D8S1179	14,15
D12S391	22
D13S317	13,14
D16S539	9,12
D18S51	16
D19S433	15
D21S11	29,32.2
FGA	20,23
Penta D	9,10
Penta E	12,15
TH01	8,9.3
TPOX	8 (PubMed=19372543)
TPOX	8,11 (AddexBio=C0016011/4916; ATCC=CRL-5826; CCRID; Cosmic-CLP=905941; PubMed=25877200)
vWA	17