skm-1细胞株（人急性髓系白血病细胞株）

SKM-1细胞系于1989年建立，来源于一名76岁男性患者的外周血。患者被诊断为骨髓增生异常综合征（MDS），并发展为急性单核细胞白血病（AMLM5）。SKM-1细胞系的特征包括遗传不稳定性、DNA修复缺陷及细胞增殖和分化控制的异常，这使其成为急性髓系白血病研究的理想模型。SKM-1细胞系为研究急性髓系白血病及其发病机制提供了重要实验材料，尤其是在探索耐药机制和药物作用方面，如地西他滨（DAC）。

skm-1细胞株特性特征

Bmi-1基因：在SKM-1细胞中，Bmi-1基因的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常骨髓组织，这表明其在MDS的发病中可能具有重要作用。
ras基因突变：最初患者存在多个ras基因的点突变，但在疾病进展过程中这些突变消失，同时伴随有p53抗肿瘤基因的染色体异常，这与遗传不稳定性相关。
核型异常：研究发现SKM-1细胞伴有染色体缺失（如del(9)(q13;q22)）和重排（如der(17)t(17;?)（p13;?）），这些异常与MDS及其向AML转化的过程密切相关。
药物耐药性：SKM-1细胞对地西他滨（DAC）的耐药性研究表明，hENT1基因的沉默会降低细胞对DAC诱导凋亡和去甲基化作用的敏感性，这为理解药物耐药机制提供了重要线

skm-1细胞株参数表

细胞名称	skm-1细胞株（人急性髓系白血病细胞株）
细胞别称	SKM-1；SKM1
组织来源	外周血（骨髓增生异常综合征患者）
细胞类型	肿瘤细胞
肿瘤类型	急性单核细胞白血病（AMLM5）
年龄（性别）	男性；76岁
生物安全等级	BSL-1
倍增时间	48小时
细胞形态	淋巴母细胞样，圆形，单个细胞
生长特性	悬浮生长
细胞代数	10代以内
支原体检测	无
培养基	RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
培养条件	气相：95%空气 + 5% CO₂；温度：37℃
换液频次	每周2-3次
传代比例	1:2 - 1:4
离心条件	离心速率：1200 rpm（约250g），离心时间：3分钟
冻存液	55% RPMI-1640 + 40% FBS + 5% DMSO
冻存方式	液氮储存
运输方式	冻存发货需加干冰运输费用；复苏发货免运输费用
供应限制	限于科学研究，不得用于动物或人类疾病的治疗产品
基因特征	Bmi-1基因高表达，ras基因突变，p53抗肿瘤基因异常
表达特征	hENT1基因在耐药机制中发挥重要作用
核型异常	染色体缺失和重排（如del(9)(q13;q22)）
注意事项	skm-1细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液

培养教程

skm-1人急性髓系白血病细胞株培养教程

SKM-1细胞复苏

从液氮罐中取出冻存的SKM-1细胞，迅速放入37°C水浴中解冻，约需1-2分钟，直至完全融化。
将解冻的SKM-1细胞转移至含10% FBS的RPMI-1640培养基中，轻轻混匀。
以500×g离心3分钟，去除上清液，加入新鲜的完全培养基，重悬SKM-1细胞。
将SKM-1细胞接种于适当的培养瓶中，放入CO₂培养箱中培养。

SKM-1细胞培养

每2-3天更换一次培养基，以去除代谢废物并提供新鲜营养。
定期观察SKM-1细胞的生长状态，待细胞密度达到80%-90%时进行传代。

SKM-1细胞传代步骤

收集悬浮的SKM-1细胞，转移至无菌离心管中，500×g离心3分钟。
弃去上清液，用新鲜的RPMI-1640完全培养基重悬SKM-1细胞。
根据实验需要调整接种密度，通常为1:2至1:4，将SKM-1细胞接种至新的培养瓶中。
将接种后的SKM-1细胞放入CO₂培养箱中继续培养。

注意事项

定期检查SKM-1细胞培养基的颜色变化（酚红指示），若出现变黄现象需及时更换。
使用显微镜观察SKM-1细胞状态，如发现异常需采取相应措施。

SKM-1细胞冻存步骤

在传代过程中，收集健康的SKM-1细胞，离心后去除上清。
将SKM-1细胞加入冻存液（55% RPMI + 40% FBS + 5% DMSO），轻轻混匀。
将混合液分装至冻存管中，标记清晰。
将冻存管放入程序降温设备中，按照设定程序降温至−80°C，然后转移至液氮罐中保存。