MT4细胞来源于一名50岁的日本患有成人T细胞白血病（ATL），伴有全身性淋巴结肿大和肝脾肿大的男性，通过将患者的外周血单核细胞与男性脐带淋巴细胞共培养建立。MT4细胞具有T细胞特征，并携带人类T细胞白血病病毒1型（HTLV-1），能够支持人类免疫缺陷病毒（HIV）的复制和生长。在实验室中处理MT-4细胞时，需遵循生物安全三级（BSL-3）标准，以确保操作的安全性。

MT4细胞特性特征

• MT4细胞携带人类T细胞淋巴病毒1型(HTLV-1)

• MT4细胞表达T细胞相关抗原CD3和CD7，但CD1a和CD8阴性

• 部分MT4细胞表达CD5，表达水平低于75%

• 具有淋巴母细胞形态学特征、以悬浮生长方式存在

• MT4细胞能够支持人类免疫缺陷病毒(HIV)的生长

• MT4细胞是一种男性细胞系，ECACC的STR分析证实存在Y染色体

MT4细胞参数表

细胞名称	MT4细胞（人T细胞白血病细胞）
细胞类型	人T细胞白血病细胞系
来源	50岁日本男性成人T细胞白血病(ATL)患者外周血白细胞
培养方式	悬浮生长
免疫表型	CD3+、CD7+、CD1a-、CD8-、部分CD5+
携带病毒	人类T细胞淋巴瘤病毒1型(HTLV-1)
培养基	RPMI-1640培养基+10%胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺、100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素
传代比例	1:2 至 1:4
培养环境	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
倍增时间	24-48小时
形态	淋巴母细胞样,圆形或卵圆形
染色体	近四倍体,高度不稳定
基因表达	高表达HTLV-1相关基因,如tax、rex
生物安全等级	BSL-3
应用	研究T细胞白血病机制、药物筛选、病毒学研究

MT4人T细胞白血病细胞培养教程

MT4细胞复苏

• 从-80°C或液氮储存中取出冻存的MT4细胞，迅速置于37°C水浴中解冻。解冻过程应快速进行，通常在1-2分钟内完成，以避免MT4细胞损伤。

• 解冻后，将MT4细胞悬液转移至含有10 mL RPMI-1640培养基的离心管中，并轻轻混匀。

离心与重悬

• 将MT4细胞以300 x g的速度离心5分钟，以去除冻存保护剂（如DMSO）。

• 弃去上清液，并将MT4细胞重悬于10 mL新鲜的RPMI-1640培养基中。

MT4细胞接种

• 将重悬后的MT4细胞转移至一个预热的培养瓶中，并补充适量的培养基至25-50 mL。

• 将培养瓶放置于37°C、5% CO2的培养箱中进行培养。

MT4细胞培养与维护

• 每2-3天观察MT4细胞的生长状态。根据细胞密度和培养基的颜色判断是否需要更换培养基。通常，当培养基pH值降低时（培养基变黄），应更换50%的培养基以维持MT4细胞的最佳生长状态。

• 当MT4细胞生长至70-80%汇合时，进行传代。

MT4细胞传代

• 吸去旧培养基，用PBS洗涤MT4细胞，然后以300 x g离心5分钟。

• 弃去上清后，用适量的培养基重悬MT4细胞，并按1:2至1:4的比例将MT4细胞接种到新的培养瓶中进行继续培养。

MT4细胞冻存（如需要）

• 当MT4细胞生长至适当密度时，可进行冻存。将MT4细胞以300 x g离心，重悬于含10% DMSO和90% FBS的冻存液中。

• 将MT4细胞分装至冻存管中，先置于-80°C保存24小时，然后转移至液氮中长期保存。

注意事项

• 生物安全性：MT4细胞携带HTLV-1，并支持HIV的生长，因此在处理MT4细胞时，应严格遵循生物安全三级（BSL-3）标准，在生物安全柜中进行操作，以防止感染和污染。

• MT4细胞监控：定期检查MT4细胞形态，观察其悬浮生长状态和细胞密度，确保MT4细胞的健康和活力。

• 培养环境稳定性：确保培养箱的温度保持在37°C，CO2浓度稳定在5%。避免频繁打开培养箱门，以维持稳定的培养环境。