HL-60细胞（人原髓细胞白血病细胞）

HL-60细胞是一种来自36岁白人女性急性早幼粒细胞白血病患者外周血的原髓细胞白血病细胞系。HL-60细胞系最初由Collins等人在1977年分离并建立，广泛应用于癌症研究、免疫学研究和药物筛选。
HL-60细胞属于早幼粒细胞（promyeloblast），呈现假二倍体染色体数目，2S成分占比6.2%，中期染色体中存在五个标记（M2至M6），同时检测到双微体（DM），但未发现着丝粒扩展（HSR）染色体。

HL-60细胞特性特征

致瘤性：HL-60细胞在裸鼠体内（皮下髓系肿瘤）能够形成肿瘤。
癌症基因：HL-60细胞表达致癌基因myc+。
基因表达：HL-60细胞在刺激下（如佛波醇肉豆蔻酸）可表达肿瘤坏死因子α（TNF-α）。
同工酶：HL-60细胞表达多种同工酶，包括AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1和PGM3。
吞噬活性：HL-60细胞表现出吞噬活性，并对趋化刺激有响应，能够参与免疫反应。
自发分化能力：HL-60细胞具有自发分化的能力，可以在特定刺激下（如丁酸盐、次黄嘌呤、DMSO、放线菌素D和视黄酸）进一步分化为成熟的粒细胞或单核细胞。
细胞因子：HL-60细胞可分泌多种细胞因子，参与调节免疫反应和细胞间的信号传递

HL-60细胞参数表

细胞名称	HL-60细胞（人原髓细胞白血病细胞）
别名	HL 60; HL60
来源	36岁白人女性急性早幼粒细胞白血病患者外周血
细胞类型	早幼粒细胞（promyeloblast）
致瘤性	在裸鼠体内形成肿瘤
癌基因	myc阳性
细胞形态	原粒细胞，悬浮生长
生物安全等级	1
培养基	IMDM + 20% FBS + 1% P/S
培养环境	95%空气 + 5% CO₂ ; 37°C
倍增时间	28-40小时
传代周期	每48-72小时传代1次
传代比例	1:3至1:6
换液频次	2-3次/周
冻存条件	55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO
基因表达	TNF-α（佛波醇肉豆蔻酸刺激后）
同工酶	AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1；Me-2，1；PGM1，1；PGM3，1
自发分化能力	丁酸盐、次黄嘌呤、PMA、DMSO、放线菌素D、视黄酸可诱导分化
吞噬活性	表现出吞噬活性
趋化反应	对趋化刺激有反应
癌症研究	研究白血病及相关疾病机制
免疫学研究	研究免疫细胞功能及其在疾病中的作用
药物筛选	作为药物反应和毒性测试的模型

培养教程

HL-60人原髓细胞白血病细胞培养教程

HL-60细胞复苏步骤

从液氮罐中取出冻存的HL-60细胞管，迅速将其放入37°C水浴中解冻，过程中轻轻摇动，以确保HL-60细胞的存活。
解冻后，迅速将HL-60细胞悬液用无菌枪头转移至15 mL离心管中。
缓慢加入5 mL预热的完全培养基，轻轻混匀，以避免对HL-60细胞的应激反应。
以900 rpm离心3分钟，弃去上清液，以便去除残余的DMSO，保护HL-60细胞的健康。
用5 mL完全培养基重悬HL-60细胞，并将细胞悬液转移至T25培养瓶中，放置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

HL-60细胞常规传代操作

当HL-60细胞密度达到1×10⁶ cells/mL时，进行传代。
将HL-60细胞悬液转移至50 mL离心管，以900 rpm离心3分钟。
弃去上清，用适量预热的完全培养基重悬HL-60细胞。
根据所需的接种密度，将重悬后的HL-60细胞接种至新的培养瓶中，并添加适量完全培养基。
轻轻摇动培养瓶以确保HL-60细胞均匀分散后，置于培养箱中继续培养。

HL-60细胞换液操作

将培养瓶竖直静置，以便HL-60细胞沉淀。
小心吸出一半的上清培养基，转移至离心管中，以保留足够的HL-60细胞用于后续培养。
以900 rpm离心3分钟，弃去上清。
用预热的完全培养基重悬沉淀的HL-60细胞。
将重悬后的HL-60细胞悬液重新加入到原培养瓶中，补足培养基至所需体积。

HL-60细胞培养注意事项

健康的HL-60细胞表现为细胞膜完整、细胞质丰富且无明显颗粒。
推荐接种密度为2-5×10⁵ cells/mL，以保持HL-60细胞的最佳生长状态。
每2-3天应更换培养基或进行传代，以维持HL-60细胞的健康生长。
传代时避免剧烈吹打，以减少对HL-60细胞的损伤。
细胞复苏后应尽快离心去除DMSO，因其对HL-60细胞具有一定的毒性。