HEL细胞系（人类红白血病细胞系）源自一名30岁白人男性患者，患有恶性红细胞白血病。HEL细胞系从患者的外周血中建立，细胞形态呈现淋巴母细胞样特征，主要以悬浮状态生长，但部分细胞也表现出贴壁生长的能力。HEL细胞提供了一种用于研究红细胞分化和球蛋白基因表达的模型，它类似于小鼠中的血友病。

HEL细胞特性特征

• EB病毒核抗原：HEL细胞为EB病毒核抗原阴性。

• 免疫球蛋白：HEL细胞表面和细胞质中均未检测到免疫球蛋白。

• HLA抗原：HEL细胞表达多种HLA抗原，包括HLA-A3、AW32和BW35。

• 其他抗原：HEL细胞还表达β-2小球蛋白和一定比例的Ia抗原。

• 珠蛋白合成：HEL细胞能够自发和诱导珠蛋白合成，主要产生Gγ和Aγ链，同时少量表达胚胎链（ε、ζ）和α链，但β链无法检测到。

• JAK2基因：通过RT-PCR和测序确认了HEL细胞中突变JAK2的表达。

• HEL细胞表达多种细胞表面标志物，包括CD3-、CD13+、CD14-、CD19-、CD33+、CD41a+、CD71+和CD235a+

• 羟基脲是一种常用于治疗各种癌症（包括红白血病）的药物，也可能调节HEL细胞的死亡。

HEL细胞参数表

细胞名称	HEL细胞（人红白细胞白血病细胞）
种属来源	人
年龄性别	30岁男性
组织来源	外周血
细胞形态	淋巴母细胞样
生长特性	悬浮生长
支原体检测	无
背景描述	源自恶性红细胞白血病患者，能诱导球蛋白合成
培养基	90% RPMI-1640 + 10% FBS
培养条件	气相：95%空气 + 5% CO2；温度：37℃
传代比例	1:2至1:3
传代频率	每周3次
传代密度	细胞密度达80%-90%时进行传代
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
细胞表面标志物	CD3-、CD13+、CD14-、CD19-、CD33+、CD41a+、CD71+、CD235a+
EB病毒核抗原	阴性
免疫球蛋白	表面和细胞质中均未检测到
HLA抗原	HLA-A3、AW32、BW35
其他抗原	β-2小球蛋白，部分细胞表达Ia抗原
JAK2基因	突变JAK2表达
细胞表型	表达cyclin D1、Bcl-2、c-Myc及Rb蛋白
细胞用途	仅供科研使用

HEL人红白细胞白血病细胞培养教程

HEL细胞呈圆形悬浮生长，偶有小聚团，部分HEL细胞会附着于培养瓶底。HEL细胞广泛应用于红细胞分化和珠蛋白基因表达的研究。

HEL细胞的复苏步骤

• 将冻存的HEL细胞管置于37°C水浴中迅速解冻。

• 解冻后，立即加入4 mL预热的完全培养基（90% RPMI-1640 + 10% FBS），轻轻混匀HEL细胞。

• 以1000 rpm离心3分钟，小心吸去上清，并用1-2 mL新鲜培养基重悬HEL细胞。

• 将HEL细胞悬液接种到T25培养瓶中，加入适量的培养基（约10-12 mL），置于37°C、5% CO2培养箱中过夜培养。

HEL细胞的常规传代步骤

• 当HEL细胞密度达到80%-90%时，需进行传代操作。

• 轻轻吹打HEL细胞以悬浮贴壁的HEL细胞，将HEL细胞悬液收集到离心管中。

• 以1000 rpm离心3-5分钟，吸去上清，并用预热的完全培养基重悬HEL细胞。

• 根据所需的传代比例（通常为1:2至1:4），将HEL细胞均匀分配到新的培养瓶中，加入适量培养基。

• 将培养瓶置于培养箱中继续培养HEL细胞。

HEL细胞的换液步骤

• 每2-3天更换一次HEL细胞培养基，确保HEL细胞获得足够的营养。

• 轻轻吹打HEL细胞，将培养基收集到离心管中，1000 rpm离心3-5分钟。

• 吸去上清，用新鲜预热的培养基重悬HEL细胞，重新接种回原培养瓶中。

• 补充足够的培养基，继续在培养箱中培养HEL细胞。

HEL细胞的计数及冻存步骤

• 取少量HEL细胞悬液，用血球计数板或自动细胞计数仪进行HEL细胞计数，确保HEL细胞浓度在适当范围内。

• 按照92% FBS + 8% DMSO的比例配制HEL细胞冻存液。

• 将HEL细胞悬浮在冻存液中，分装到预冷的冻存管中，每管装入200-300万HEL细胞。

• 将HEL细胞冻存管置于-80°C冰箱中过夜，次日转移至液氮罐中长期保存HEL细胞。

重要注意事项

• 轻柔操作：在传代HEL细胞时，应轻轻吹打HEL细胞，避免产生气泡，以防止对HEL细胞的机械损伤。

• 无抗生素培养：HEL细胞培养基中不建议加入抗生素，以避免掩盖可能的细菌污染。

• 定期监测：定期检查HEL细胞形态和生长状态，如发现异常应及时处理。

• 悬浮与贴壁特性：HEL细胞主要以悬浮形式生长，但部分HEL细胞会贴壁。在传代和换液过程中，应注意轻轻吹打HEL细胞，确保悬浮HEL细胞均匀收集。

• HEL细胞密度控制：建议将悬浮的HEL细胞的生长密度保持在（1-5）x10^5 cells/mL之间，以维持HEL细胞的健康状态。