TF-1细胞系是由Kitamura T.等人于1987年从一名患有严重全血细胞减少症的35岁日本男性的骨髓中分离。TF-1细胞是研究骨髓祖细胞增殖和分化的有力工具。

TF-1细胞系起源于骨髓，并表现出红系谱系的特征，尽管TF-1细胞来自一位被诊断为红白血病的患者。

TF-1细胞特性特征

• 反应性：TF-1细胞对其他淋巴因子和多种细胞因子有反应，包括IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、干细胞因子（SCF）、白血病抑制因子（LIF）和神经生长因子（NGF）。

• 无反应：对IL-5无反应，这是一个独特特征。

• 不表达：TF-1细胞不表达血型糖蛋白A（GPA）和碳酸酐酶I。

• 组成性表达：珠蛋白基因的组成性表达表明TF-1细胞对红系谱系的承诺。

• 分化能力：可被诱导分化为红细胞或巨噬细胞样细胞。

• 诱导剂：血红素和δ-氨基乙酰丙酸可诱导血红蛋白合成，TPA可诱导向巨噬细胞样细胞分化

• TF-1 细胞完全依赖白细胞介素3（IL-3）或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）进行长期生长。

TF-1细胞参数表

细胞名称	TF-1细胞（人血液白血病细胞）
别称	TF1; MFD-1; TF-1; 人红白血病细胞
种属	人
年龄性别	35岁，男性
组织来源	骨髓
生长特性	半贴壁半悬浮
细胞形态	淋巴母细胞样，圆形或贴壁铺开
细胞直径	15-20 μm
生物安全	1级
细胞代数	10代以内
培养基	RPMI-1640 + 10% FBS + 2ng/ml rhGM-CSF + 1% PS
培养条件	37℃，95%空气 + 5%二氧化碳
生长因子	完全依赖IL-3或GM-CSF
倍增时间	约36-72小时
细胞密度	>1x10^6个/T25方瓶
传代方式	尽量少离心，可直接补液
基因特征	存在CBFA2T3-ABHD12基因融合
不表达	血型糖蛋白A和碳酸酐酶I
组成性表达	珠蛋白基因
有反应	IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF
无反应	IL-5
红细胞分化	血红素和δ-氨基乙酰丙酸可诱导血红蛋白合成
巨噬细胞分化	TPA可诱导向巨噬细胞样细胞分化
保藏机构	ATCC: CRL-2003; DSMZ: ACC-334; ECACC: 93022307
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
支原体检测	阴性
细菌真菌	阴性
供应限制	仅限于科学研究，不可用于治疗

TF-1人血液白血病细胞培养教程

TF-1细胞复苏操作

• 将TF-1细胞冻存管从液氮中取出，迅速放入37°C水浴中解冻。

• 解冻后立即将TF-1细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。

• 低速离心（约200g，5分钟）去除冻存液。

• 弃上清，用新鲜培养基重悬TF-1细胞。

• 将TF-1细胞转移到培养瓶中，置于培养箱内培养。

TF-1细胞传代操作

• TF-1细胞呈半贴壁半悬浮生长，传代时尽量减少离心操作。

• 传代时可直接补液或轻轻吹打贴壁的TF-1细胞后收集。

• 维持TF-1细胞密度在>1x10^6个/T25方瓶。

• TF-1细胞传代比例通常为1:2到1:3，每3-4天传代一次。

TF-1细胞注意事项

• 确保TF-1细胞培养基中始终含有足够的GM-CSF，因TF-1细胞对生长因子依赖性强。

• 如果TF-1细胞状态不佳，可适当增加血清浓度（>10% FBS）。

• 观察TF-1细胞形态：正常生长的TF-1细胞呈圆形或贴壁铺开。

• TF-1细胞倍增时间约为36-72小时，根据实际生长情况调整传代频率。

• 区分TF-1细胞脱落的细胞质颗粒与细菌污染。

TF-1细胞冻存操作

• 使用无血清冻存液冻存TF-1细胞。

• TF-1细胞密度约为1x10^6个/ml。

• 缓慢降温后将TF-1细胞转移到液氮中长期保存。

TF-1细胞质量控制

• 定期进行TF-1细胞支原体检测。

• 观察TF-1细胞形态，确保无异常变化。

• 必要时进行TF-1细胞STR鉴定，以确保细胞系纯度。

TF-1细胞在不同条件下的表现

TF-1细胞在添加GM-CSF和IL-3时的表现区别

• GM-CSF:

• 生长特性: 在添加GM-CSF的培养基中，TF-1细胞能够良好生长，呈现半贴壁半悬浮状态。

• 形态特征: TF-1细胞呈圆形或贴壁铺开，细胞质颗粒较多。

• 依赖性: GM-CSF是TF-1细胞生长所必需的因子，缺乏GM-CSF会导致TF-1细胞生长速度严重下降或停止。

  
  

• IL-3:

• 生长特性: 在添加IL-3的培养基中，TF-1细胞表现出与GM-CSF相似的生长特性。

• 形态特征: TF-1细胞形态与GM-CSF培养条件下相似，呈圆形或贴壁铺开。

• 依赖性: IL-3也是TF-1细胞生长所必需的因子，缺乏IL-3会导致TF-1细胞生长速度下降。

TF-1细胞在不同培养基中的形态变化

• 标准培养基（RPMI-1640 + 10% FBS + 2 ng/ml GM-CSF或IL-3）:

• 形态: 正常生长的TF-1细胞呈圆形或贴壁铺开，细胞脱落大量的细胞质颗粒，TF-1细胞直径为15-20 μm，细胞核大而粗，胞浆嗜碱性，胞浆泡多发。

• 电镜下形态: 透射电子显微镜下，TF-1细胞核呈锯齿状；扫描电子显微镜下，TF-1细胞表面呈绒毛状，有少量泡。

  
  

• 无因子培养基:

• 形态变化: 在不添加GM-CSF或IL-3的培养基中，TF-1细胞生长速度显著下降，TF-1细胞形态变差，出现较多细胞碎片和死亡TF-1细胞。

  
  

• 高血清培养基:

• 形态变化: 在高血清（>10% FBS）的培养基中，TF-1细胞的生长状态可能有所改善，特别是在TF-1细胞状态不佳时，适当增加血清浓度有助于维持TF-1细胞活力。

TF-1细胞对FBS的依赖性

• 依赖程度:

• TF-1细胞对胎牛血清（FBS）有一定的依赖性，标准培养基中通常添加10% FBS以维持TF-1细胞的正常生长。

• 在TF-1细胞状态不佳时，适当增加血清浓度（如15% FBS）可以改善TF-1细胞生长状态。