A3细胞人T淋巴细胞白血病细胞来源于Jurkat细胞系，通过用Fas抗体处理Jurkat细胞，并采用限制性稀释法分离，获得了对Fas药物诱导的细胞凋亡具有低自发抗性的细胞系。

其中两个ICR-191处理过的克隆中的两个已被保藏在ATCC。它们是I 9.2（ATCC CRL-2571），一个半胱氨酸蛋白酶胱天蛋白酶8/FLICE突变的克隆，和I 2.1（ATCC CRL-2572）， 一种衔接子FADD突变的克隆。

A3细胞特性

• A3细胞亚克隆自Jurkat细胞系。

• 用Fas抗体处理Jurkat细胞，并通过限制性稀释进行分离，获得对Fas药物诱导的细胞凋亡具有低自发抗性的细胞系。

• 野生型A3亚克隆对Fas介导的细胞凋亡非常敏感。

• 使野生型A3细胞对新霉素产生耐药性，并用三个周期的移码诱变剂ICR-191处理，分离出对Fas抗体杀伤具有耐药性的隐性突变的克隆。

• 在Fas抗体存在下，将ICR-191处理的克隆在96孔板中连续稀释3-5周。

• ICR-191处理过的克隆中的两个已被保藏在ATCC。它们是I 9.2（ATCC CRL-2571）和I 2.1（ATCC CRL-2572）。

• A3细胞对Fas介导的凋亡产生自发抗性的比例较低，因此对Fas-介导的凋亡十分敏感。

A3人T淋巴细胞参数表

细胞名称	A3细胞 (人T淋巴细胞白血病细胞)
别称	Jurkat clone A3
种属	人
性别/年龄	男
组织来源	T细胞白血病，T淋巴细胞
疾病	急性T细胞白血病
细胞类型	肿瘤细胞
肿瘤类型	白血病细胞
生长特性	悬浮细胞
生物安全等级	BSL-1
冻存条件	55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO；液氮储存
生长培养基	RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
培养条件	37℃, 95% 空气, 5% CO2
推荐换液频率	2-3次/周
污染检测	支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
细胞用途	仅供科研使用
背景描述	A3细胞亚克隆自Jurkat细胞系，是通过用Fas抗体处理Jurkat细胞，用有限稀释法获得一个细胞系。
保藏机构	ATCC

A3人T淋巴细胞白血病细胞培养

A3细胞复苏

• 将含有1mL A3细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。

• 将解冻后的A3细胞悬液加入含有5mL培养基的离心管中混合均匀。

• 在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液。

• 用4-6mL培养基重悬A3细胞，并将细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或加入6cm皿中培养）。

• 第二天换液并检查A3细胞密度。

A3细胞传代

• 当A3细胞密度达80%-90%时，可进行传代培养。

方法一：

• 收集A3细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液。

• 用1-2mL培养液重悬A3细胞，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含有8mL培养基的新皿或瓶中。

方法二：

• 弃去半数培养基后，将剩余A3细胞悬起。

• 按1：2到1：3的比例将A3细胞悬液分到新的含有8mL培养基的新皿或瓶中。

A3细胞冻存

• A3细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

• 贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，待A3细胞变圆脱落后，进行离心收集。

• 在1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清。

• 按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。

• 将A3细胞分配到冻存管中，标注名称、代数、日期等信息。

• 置于程序降温盒中，在-80℃冰箱中过夜后转入液氮容器中储存，并记录好位置。