Panc 05.04人胰腺癌上皮细胞系于1995年从一名77岁白人女性胰腺腺癌患者的原发肿瘤中分离，广泛应用于癌症研究，特别是胰腺癌的分子机制和药物筛选。Panc 05.04细胞由ATCC（美国典型培养物保藏中心）提供，标识号为CRL-2557。Panc 05.04细胞表现为上皮样形态，贴壁生长。

Panc 05.04细胞特性特征

• K-ras基因在12号密码子处发生GGT->GAT突变，导致天冬氨酸替代甘氨酸、表达K-ras癌基因

• 抗原表达：MHC I类+；MHC II类-   B型血；Rh+

• 基因表达：细胞角蛋白7；细胞角蛋白18；K-ras+；MHC I类+；MHC II类；B型血；Rh+

• Panc 05.04细胞在裸小鼠或SCID小鼠体内具有致瘤性

• Panc 05.04细胞铺覆效率为100%

• 一般保持10代以内以确保遗传稳定性

Panc 05.04细胞参数表

Panc 05.04人胰腺癌细胞培养教程

细胞接收后的初步处理

• 状态检查：收到Panc 05.04细胞后，首先检查培养瓶的完整性和培养基的清洁度，确保没有破损、泄漏或污染。如发现问题，请拍照记录并立即联系供应商。

• 消毒步骤：使用75%酒精消毒Panc 05.04细胞培养瓶的外壁，然后将其转移至超净工作台。

• 初步培养：将Panc 05.04细胞培养瓶放入37℃的培养箱中静置2-4小时，以便稳定细胞状态。

细胞复苏步骤

• 将冻存的Panc 05.04细胞悬液（1 mL）迅速解冻于37℃水浴中，同时轻轻摇动冻存管以确保均匀解冻。

• 向解冻的细胞悬液中加入5 mL完全培养基（RPMI 1640 + 15% FBS + 20 U/mL人重组胰岛素），混合均匀后，在1000 RPM下离心5分钟，弃去上清液。

• 向细胞沉淀中添加4-6 mL完全培养基，轻轻吹打混合。

• 将混合后的Panc 05.04细胞悬液转移至培养瓶或6 cm培养皿中，在37℃、5% CO₂的培养箱中培养过夜。

细胞传代操作

• 当Panc 05.04细胞密度达到80%-90%时，进行传代操作。

• 首先弃去培养上清液，用无钙镁离子的PBS溶液清洗细胞1-2次。

• 加入适量的0.25%胰蛋白酶，轻轻摇动培养瓶，待细胞脱离后立即加入培养基中和胰蛋白酶。

• 将细胞悬液在1000 RPM下离心5分钟，弃去上清液，补加适量的完全培养基。

• 按照细胞密度和实验需求，将Panc 05.04细胞悬液以1:2的比例接种至新的培养瓶中。

注意事项

• 细胞监控：定期观察Panc 05.04细胞的形态和生长状态，确保细胞无污染且状态良好。

• 生物安全措施：所有操作均应在生物安全柜中进行，佩戴适当的个人防护装备。

• 废弃物处理：所有废液及接触过Panc 05.04细胞的器材应严格按照生物安全规范处理。

• 细胞冻存：在Panc 05.04细胞状态良好的情况下，使用无血清冻存液将细胞冻存于液氮或-80℃冰箱中，以备后续使用。