HPTF-SV40细胞系是一种通过慢病毒介导的SV40大T抗原转染获得的永生化人胰腺肿瘤成纤维细胞系。HPTF细胞系来源于手术切除的人类胰腺癌组织，通过SV40大T抗原的引入，使得这些细胞在体外能够长期培养，并且具备强大的增殖能力，至少可以稳定传代20代以上。HPTF-SV40细胞系特别适用于研究胰腺癌的生物学特性，肿瘤微环境分析以及药物筛选等科学研究领域。

HPTF细胞SV40永生化参数表

HPTF人胰腺肿瘤成纤维细胞SV40永生化培养教程

HPTF细胞复苏

• 从液氮中取出冻存管，并迅速放入37℃水浴中解冻，解冻时轻轻摇动冻存管以加速过程。

• 解冻后，立即将HPTF细胞悬液转移到含有4-6 mL预温完全培养基的离心管中，充分混合。

• 以1000 RPM离心3-5分钟，弃去上清液。

• 用新鲜的完全培养基重悬HPTF细胞，并轻轻混匀。

• 将重悬后的HPTF细胞悬液接种到T25培养瓶中，根据瓶型添加10-12 mL的培养基。

• 将培养瓶置于37℃、5% CO₂、湿度70%-80%的培养箱中培养。

HPTF细胞传代

• 观察HPTF细胞的融合度，当融合度达到70%-80%时，准备进行传代。

• 预先准备好新的培养瓶和新鲜的培养基。

• 吸去旧的培养基。

• 用3-4 mL室温PBS轻轻冲洗HPTF细胞，以去除残留培养基。

• 加入1 mL胰蛋白酶，轻轻摇晃培养瓶使胰酶均匀覆盖HPTF细胞。

• 将培养瓶放入37℃培养箱中消化，观察HPTF细胞的变化。当细胞开始脱落时，立即终止消化。

• 加入2-3 mL完全培养基终止胰酶作用，混匀后在1000 RPM下离心3-5分钟，弃去上清液。

• 使用新鲜培养基重悬HPTF细胞，并根据需要将其均匀分配至新的培养瓶中。

• 根据HPTF细胞的生长速度和密度，通常采用1:2至1:4的传代比例。

HPTF细胞冻存

• 消化并离心后，将HPTF细胞沉淀重悬于冻存液中。

• 将细胞悬液分装至标记好的冻存管中。

• 将冻存管放入程序降温盒中，逐步降温至-80℃，随后转移至液氮罐中长期保存。

注意事项

• 培养基应避免长时间暴露在常温环境，以防止HPTF细胞的污染。

• 胰蛋白酶处理时间应控制得当，避免过度消化导致HPTF细胞损伤。

• 在HPTF细胞运输过程中，应避免剧烈振动，确保细胞的完整性。

• 定期检查HPTF细胞的生长状态，确保无污染，并观察细胞形态和增殖情况。