BxPC-3细胞系源自一位61岁女性胰腺腺癌患者的活检组织，首次分离于1986年。BxPC-3细胞具有上皮细胞形态，广泛用于胰腺癌的研究，特别是在探讨肿瘤形成和治疗策略方面。

BxPC-3细胞特性特征

• BxPC-3细胞在无胸腺裸鼠中具有致瘤性，在皮下接种10（7）个细胞的裸鼠中，肿瘤在21天内以100%的频率（5/5）发展。

• BxPC-3细胞表现出中等分化能力，能产生粘蛋白，胰腺癌症特异性抗原（胰腺癌症相关抗原）；癌胚抗原

• 不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR)

• 不携带胰腺癌常见的KRAS突变

BxPC-3细胞（人原位胰腺腺癌细胞）参数表

BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞培养教程

复苏步骤

• 从液氮中取出冻存的BxPC-3细胞管，迅速转移至-80℃冰箱中放置数分钟，以挥发残余液氮。

• 在超净台内，将BxPC-3细胞冻存管放入37℃水浴中，轻轻摇晃1-2分钟，直至BxPC-3细胞完全解冻。

• 使用无菌移液器将解冻的BxPC-3细胞悬液转移至含有6-7 mL完全培养基的15 mL离心管中，轻轻混匀。

• 以1000 rpm离心5分钟，去除上清液，获得纯净的BxPC-3细胞沉淀。

• 用新鲜的完全培养基重悬BxPC-3细胞，并将细胞悬液转移至T25培养瓶中，加入10 mL培养基。

• 将BxPC-3细胞培养瓶置于37℃、5% CO2培养箱中培养，观察BxPC-3细胞贴壁情况。

BxPC-3细胞传代

• 当BxPC-3细胞生长至80%-90%汇合时，进行传代。

• 在超净台内，用75%酒精消毒BxPC-3细胞培养瓶外表面。

• 吸去旧培养基，加入无菌PBS轻轻洗涤BxPC-3细胞，去除死细胞及代谢废物。

• 加入适量0.25%胰蛋白酶，轻轻摇晃培养瓶，使其均匀覆盖BxPC-3细胞表面，置于37℃培养箱中孵育2-5分钟。

• 观察BxPC-3细胞开始脱落时，立即加入等体积的完全培养基中和胰蛋白酶。

• 将BxPC-3细胞悬液转移至15 mL离心管中，1000 rpm离心5分钟，去除上清液。

• 用新鲜的完全培养基重悬BxPC-3细胞，并按1:3至1:4的比例接种至新T25或T75培养瓶中。

• 将BxPC-3细胞培养瓶放回37℃、5% CO2培养箱中，继续培养。

BxPC-3细胞冻存

• 选择对数生长期的BxPC-3细胞进行冻存，以确保细胞状态最佳。

• 配制冻存液：50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO。

• 将BxPC-3细胞悬液重悬于冻存液中，分装至冻存管内。

• 将BxPC-3细胞冻存管逐步冷冻：首先置于-80℃冰箱中过夜，然后转移至液氮中长期保存。