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产品名称:MIA PaCa2细胞(人胰腺癌细胞)
产品详细说明
  • 来源:胰腺;人胰腺导管腺癌细胞
  • 细胞特征:半贴半悬 , 上皮样贴壁细胞,伴有圆形漂浮细胞
  • 培养基:生长培养基:DMEM+10%FBS+2.5%HS+1%P/S
  • 其他:MIA PaCa-2细胞对天冬酰胺酶表现出敏感性

MIA PaCa-2细胞系是从一名65岁的白种男性胰腺癌患者的肿瘤组织中分离并建立的上皮细胞系。MIA PaCa-2细胞系的建立始于1975年,由A. Yunis等人完成,并于1977年正式确立。

MIA PaCa-2细胞是一种低分化的二倍体人源胰腺癌细胞系,显示出近三倍体的染色体组成,模态染色体数为61,单细胞内通常存在16到20条标记染色体,同时也有少数正常染色体缺失的现象。

MIA PaCa-2细胞生物学特征:约40小时的细胞倍增时间和约19%的软琼脂集落形成效率。此外,该细胞系对天冬酰胺酶表现出敏感性。

MIA PaCa-2细胞系的基因表达特征

  • 细胞角蛋白表达:MIA PaCa-2细胞表达细胞角蛋白5.6(Cytokeratin 5.6)和AE1/AE3。

  • 粘附分子表达:表达E-钙粘蛋白(E-cadherin),这是一种重要的细胞粘附分子。

  • 细胞骨架蛋白表达:表达波形蛋白(vimentin),这是一种中间丝蛋白,常见于间质细胞。

  • 神经内分泌标志物表达:表达嗜铬粒蛋白A(chromogranin A)和突触素(synaptophysin),这些是神经内分泌细胞的标志物。

  • 受体表达:表达生长抑素受体2(SSTR2)和神经降压素受体1(NTR1)。

  • 不表达的蛋白:值得注意的是,MIA PaCa-2细胞不表达神经元黏附分子(neural cell adhesion molecule, NCAM)。

  • 其他表达:MIA PaCa-2细胞还表达人集落刺激因子I(CSF-I)和纤溶酶原激活剂。

  • 酶表达:显示出G6PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)和B同工酶类型。

MIA PaCa2细胞参数表

细胞名称 MIA PaCa2细胞(人胰腺癌细胞)
别名 MIA-PaCa-2; MIA-PACA-2; MIA-Pa-Ca-2; MIA Paca2; MIA PaCa2; MiaPaCa-2; MIAPACA-2;MiaPaca.2; MiaPaCa2; Miapaca2; MIAPaCa2; MIAPACA2; Mia PACA 2; MIAPaCa-2; PaCa2
ATCC编号 CRL-1420
细胞类型/来源 人胰腺导管腺癌细胞
患者信息 65岁高加索男性
建立信息 1975年由A. Yunis等人建立,1977年正式确立
细胞形态/生长特性 上皮样,圆形 / 半贴壁生长 / 低分化
生长参数 倍增时间:25.7±4.3小时(单层),40小时(软琼脂) / 饱和密度:1.5×10^5细胞/cm² / 克隆形成效率:19%(软琼脂)
细胞周期分布 G0/G1: 60-65%, S: 20-25%, G2/M: 10-15%
染色体 近三倍体,模态数61,16-20条标记染色体/细胞
基因突变 KRAS (G12C), TP53 (R248W), CDKN2A/p16 (缺失)
培养基/添加物 DMEM高糖 + 10%胎牛血清 + 2.5%马血清 + 1%丙酮酸钠(可选) + 1%青霉素/链霉素
培养环境 37°C, 95%空气+5% CO2, 70-80%湿度
传代/换液 传代比例1:2至1:6 / 每2-3天换液
表达基因/蛋白 CSF-I, 纤溶酶原激活剂, 细胞角蛋白5.6, AE1/AE3, E-钙粘蛋白, 波形蛋白, 嗜铬粒蛋白A, 突触素, SSTR2, NTR1
不表达/酶活性 不表达NCAM / G6PD和B同工酶活性
信号通路/转录因子 MAPK/ERK和PI3K/AKT通路激活 / NF-κB活性增强
致瘤性/转移潜能 在裸鼠中可形成肿瘤 / 较高转移潜能
药物/放射敏感性 对天冬酰胺酶敏感,对吉西他滨有一定耐药性 / 相对放射抗性
代谢特点 高葡萄糖消耗和乳酸产生 / 中等谷氨酰胺依赖性
免疫相关表达 MHC I低表达 / PD-L1中等表达
冻存/复苏方法 10% DMSO + 90%完全培养基,液氮保存 / 37°C水浴快速解冻
检测与鉴定 无菌(细菌、真菌、支原体阴性),HIV/HBV/HCV阴性 / STR分析确认
研究应用 胰腺癌、药物筛选、信号通路、耐药机制、转移机制研究
相关模型 3D培养可形成类器官结构 / 可建立皮下和原位异种移植模型
应激条件耐受性 可耐受24-48小时血清饥饿 / 可在1% O2低氧条件下存活

培养教程

MIA PaCa2人胰腺癌细胞培养教程

细胞复苏

  • 冻存管在37°C水浴中快速解冻(1-2分钟)。

  • 将细胞悬液转移到含4-6mL预热完全培养基的离心管中。

  • 以1000rpm离心3-5分钟,去除上清。

  • 用完全培养基重悬细胞,并接种到含6-8mL完全培养基的T25培养瓶中。

传代

  • 传代时机: 当细胞密度达到70-90%时进行传代。

  • 传代步骤: a. 收集培养基中的悬浮细胞。 b. 用PBS洗涤贴壁细胞。 c. 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C下消化1-2分钟。 d. 加入完全培养基终止消化。 e. 轻轻吹打混合细胞。 f. 以1000rpm离心3-5分钟,去除上清。 g. 用新鲜完全培养基重悬细胞。 h. 按1:3到1:8的比例接种到新的培养瓶中。

冻存

  • 冻存液配制: 使用55%基础培养基 + 40%FBS + 5% DMSO的冻存液。

  • 细胞密度调整: 调整细胞密度至1-2 × 10^6 cells/mL。

  • 冻存过程: 缓慢降温后转入液氮保存。

注意事项

  • 首次传代建议使用1:2的比例。

  • 注意收集和保留悬浮细胞。

  • 消化时间不要过长,避免损伤细胞。

  • 定期进行细菌、真菌和支原体检测。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 10
D1S1656 15,17.3
D2S441 14
D2S1338 25
D3S1358 16
D5S818 12,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227)
13 (PubMed=17254797)
D6S1043 12
D7S820 12 (KCLB=21420)
12,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=17254797; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227)
D8S1179 16
D10S1248 14,15
D12S391 19
D13S317 12,13
D16S539 10,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227)
11,13 (PubMed=17254797)
D18S51 12
D19S433 15
D21S11 29,31 (PubMed=17254797)
29,31.2 (ATCC=CRL-1420; CCRID; DSMZ=ACC-733; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200)
D22S1045 16
FGA 22
Penta D 12,16
Penta E 13,18
TH01 9,10
TPOX 9
vWA 15
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