nci-h1650人非小细胞肺癌细胞系培养教程

细胞复苏

• 将冻存NCI-H1650细胞从液氮中取出，迅速放入37°C水浴中解冻。

• 1100 rpm离心4分钟，室温，弃上清，用5 mL预热的完全培养基重悬细胞。

• 将细胞转移到T25 cm2培养瓶或6cm培养皿中。

日常培养

• 每2-3天更换一次培养基。

• 使用显微镜观察NCI-H1650细胞生长状态（推荐倍率：100X和40X）。

细胞传代

• 当NCI-H1650细胞密度达到70-80%时进行传代。

• 用PBS洗涤细胞1-2次，加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液，37°C孵育2-3分钟。

• 加入等体积完全培养基终止消化，1100 rpm离心4分钟，弃上清，用新鲜完全培养基重悬细胞，按1:2至1:4的比例接种到新的培养瓶中。

细胞冻存

• 制备冻存液：50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO。

• 将NCI-H1650细胞悬浮于冻存液中，每管约1x10^6细胞。

• 使用程序降温盒或梯度降温，最终转入液氮中长期保存。

注意事项

• 使用无菌操作和无菌器材。

• 定期更换培养基，注意细胞污染情况。

• 定期进行NCI-H1650细胞的细胞特性验证和STR鉴定。

• 保持培养环境清洁，个人防护措施要到位。