K1(GLAG-66)细胞系来源于一名58岁男性患者的原发性乳头状甲状腺癌组织。K1(GLAG-66)细胞系保留了甲状腺滤泡细胞的分化特性，能够合成甲状腺球蛋白，显示出上皮样形态，贴壁生长。这些特性使其在甲状腺癌研究中具有重要的应用价值，特别是在研究肿瘤发生、发展机制以及药物筛选和治疗策略的探索方面。文献表明K1细胞系与GLAG-66细胞系密切相关，进一步确认了其作为甲状腺癌研究模型的可靠性。

K1细胞（GLAG-66细胞系）特性特征

• 基因表达：K1细胞系表达野生型p53，这一基因在肿瘤发生中起着重要的抑制作用。

• 甲状腺相关基因：维持甲状腺滤泡细胞的分化能力，能够合成甲状腺球蛋白

K1细胞（GLAG-66细胞系）参数表

K1（GLAG-66细胞）人甲状腺癌细胞系培养教程

细胞复苏

• 完全培养基：GLAG-66细胞的培养基使用F-12K基础培养基，加入10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素混合双抗。

• 预热培养基：将5 mL的完全培养基在37℃水浴中预热，为GLAG-66细胞的解冻做准备。

• 从液氮或-80℃冰箱中取出GLAG-66细胞的冻存管，迅速置于37℃水浴中，轻轻摇晃以加速解冻。

• 解冻后的GLAG-66细胞立即转移至含有4 mL预热完全培养基的15 mL离心管中，轻轻混匀。

• 以1000 rpm离心3分钟，弃去上清。

• 加入1-2 mL完全培养基重悬GLAG-66细胞。

• 将GLAG-66细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量完全培养基。

• 将培养瓶置于37℃、95%空气和5% CO₂的培养箱中过夜培养。

• 第三天更换培养基，并定期观察GLAG-66细胞的生长状态。

细胞传代

• 当GLAG-66细胞在培养瓶表面达到80%-90%密度时，可进行传代。

• 弃去培养上清，用不含钙镁的PBS冲洗GLAG-66细胞1-2次。

• 加入1 mL胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%胰蛋白酶和0.02% EDTA），确保GLAG-66细胞表面均匀覆盖消化液。

• 将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟，观察GLAG-66细胞状态，当细胞开始变圆并脱落时，轻敲瓶壁帮助细胞完全脱离。

• 加入2-3 mL完全培养基终止消化过程，轻轻混匀后转移至无菌离心管中。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，再次用完全培养基重悬GLAG-66细胞。

• 将GLAG-66细胞悬液按1:2或1:3比例重新接种至新培养瓶中，加入8 mL完全培养基后，继续培养。

细胞冻存

• 冻存GLAG-66细胞使用的冻存液为90%胎牛血清和10%二甲基亚砜（DMSO），现用现配。

• 当GLAG-66细胞生长状态良好时，收集细胞并用PBS冲洗，转移至无菌离心管中。

• 以1000 rpm离心4分钟，弃去上清后，用PBS洗涤一次。

• 将GLAG-66细胞重悬于适量冻存液中，确保细胞密度适宜（通常为1 mL）。

• 将含有GLAG-66细胞的冻存管放入-80℃冰箱中过夜，随后转移至液氮储存。