ACT1细胞系起源于一例甲状腺未分化癌（Anaplastic Thyroid Carcinoma, ATC）患者的肿瘤组织，甲状腺间变性癌（NCIt:C3878），是通过酶消化法进行原代培养，并经过单细胞克隆筛选获得。ACT1细胞呈上皮样生长，常用于研究甲状腺未分化癌的生物学特性及潜在的治疗策略。

ACT1细胞特性特征

• 基因表达：ACT1细胞系可能表达与癌症相关的多种基因，包括促进细胞增殖和抑制凋亡的基因。这些基因的表达特征与未分化癌的恶性程度密切相关。

• 突变特征：ACT1细胞可能携带特定的基因突变，这些突变与甲状腺癌的发生和发展有关。

• 支原体检测：在细胞培养过程中，ACT1细胞经过支原体检测，结果为阴性，确保细胞的纯度和实验的可靠性。

ACT1细胞参数表

ACT1人未分化甲状腺癌细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出ACT1细胞冻存管，并立即放入37°C水浴中，轻轻摇晃，使细胞迅速解冻。

• 准备DMEM高糖培养基，补充10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素-链霉素）。

• ACT1细胞完全解冻后，将悬液转移到离心管中，加入4 mL预温的培养基，轻轻混合。

• 在1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。

• 加入1-2 mL新鲜培养基，轻轻吹打ACT1细胞沉淀，确保细胞分散均匀。

• 将重悬的ACT1细胞转移至T25培养瓶中，加入8 mL培养基，置于37°C、5% CO2的培养箱中培养过夜。

细胞传代

• 当ACT1细胞生长覆盖瓶底的80%-90%时，可以进行传代操作。

• 弃去旧的培养基，用无钙镁的PBS轻柔洗涤ACT1细胞1-2次，以去除残留的培养基成分。

• 加入1 mL胰蛋白酶-EDTA溶液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），置于37°C培养箱中消化1-2分钟，观察ACT1细胞逐渐变圆并开始脱附。

• 当ACT1细胞脱附后，加入适量培养基以中和胰蛋白酶，轻轻吹打确保细胞完全悬浮。

• 在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液，加入6-8 mL培养基，轻轻混匀。

• 按1:2或1:3比例将ACT1细胞悬液分配到新的培养瓶中，补充新鲜培养基。

细胞冻存

• 冻存液通常由90%的完全培养基和10%的DMSO（二甲基亚砜）组成。

• 当ACT1细胞生长状况良好时，洗涤并用胰蛋白酶消化细胞。消化后将ACT1细胞重悬于冻存液中。

• 将ACT1细胞悬液分装到冻存管中，做好标记，确保每管含有足够数量的细胞。

• 将冻存管放入程序化降温盒中，置于-80°C冰箱中预冻24小时后，转移至液氮中长期保存。

注意事项

• 无菌操作：在整个培养过程中应保持无菌操作，避免ACT1细胞污染。

• 培养环境监控：定期观察ACT1细胞的形态和生长状态，确保细胞健康并及时进行传代。

• 培养基更换：每2-3天更换培养基，维持ACT1细胞培养环境的稳定和清洁。

常见问题

• 细胞密度过高：如果ACT1细胞密度过高，应及时进行传代，否则会导致细胞接触抑制，影响生长。

• 解冻后细胞活力下降：解冻后ACT1细胞活力可能有所下降，但通常经过1-2次传代后能恢复至正常生长状态。