Nthy-ori 3-1 细胞系来源于人类甲状腺滤泡上皮细胞，是正常而非癌变的甲状腺细胞系。科学家将含有起源缺陷的 Simian virus 40 (SV40) 基因组（SV-ori）质粒转染至正常的人类甲状腺滤泡上皮细胞中实现永生化。SV40 DNA 的作用不仅能使这些细胞永生化，还能保留它们的多种功能。

Nthy-ori 3-1 细胞系有着广泛应用，包括转染实验和病毒学研究，还用于探索人类甲状腺的生长和调控机制，并在 microRNA（miRNA）表达谱分析中发挥重要作用。

Nthy-ori 3-1细胞特征特性

分子特征

• 表达甲状腺特异性蛋白：Nthy-ori 3-1细胞表达多种甲状腺特异性蛋白，包括甲状腺球蛋白（Thyroglobulin, TG）、甲状腺过氧化物酶（Thyroid peroxidase, TPO）和钠/碘共转运体（Sodium/iodide symporter, NIS）。

• 激素反应性：这些细胞对甲状腺刺激激素（TSH）具有反应性，可以模拟正常甲状腺细胞的激素调节机制。

表达特征

• 上皮细胞标志物：Nthy-ori 3-1细胞表达典型的上皮细胞标志物，如细胞角蛋白（Cytokeratin）。

• 甲状腺功能相关基因：这些细胞表达与甲状腺激素合成和分泌相关的基因，包括甲状腺球蛋白（TG）、甲状腺过氧化物酶（TPO）和钠/碘共转运体（NIS）基因。

基因特征

• 正常核型：Nthy-ori 3-1细胞保持正常的人类二倍体核型，没有明显的染色体异常。

• 无癌基因突变：这些细胞不携带常见的甲状腺癌相关基因突变，如BRAF V600E或RAS突变，这使它们成为研究甲状腺癌发生机制的理想对照。

其他特性

• 生长特性：Nthy-ori 3-1细胞呈贴壁生长，形态为上皮样。

• 稳定性：这些细胞在体外培养条件下保持相对稳定的表型和基因型特征。

• 可转染性：Nthy-ori 3-1细胞可以被用来构建稳定表达外源基因的细胞系，如荧光素酶表达细胞系（Nthy-ori 3-1-Luc），这为更复杂的实验设计提供了可能。

• 碘代谢：这些细胞保留了正常甲状腺细胞的碘摄取和代谢能力，可用于研究甲状腺激素合成过程

Nthy-ori 3-1细胞参数表

细胞名称	Nthy-ori 3-1细胞（人甲状腺正常细胞）
细胞别称	Nthy ori 3.1；Nthy-ori 3.1；NTHY-ORI3.1；HTori-3.1；nythori31
细胞类型	人类甲状腺正常上皮细胞
细胞形态	贴壁生长，呈圆形、椭圆形或不规则形状；
生长特性	形成单层或多层细胞群落
培养基	特定的细胞培养基，通常添加10%胎牛血清
培养条件	37°C，5% CO2，pH 7.2-7.4
传代信息	每2-3天传代一次，80%汇合度时消化传代；胰酶消化1~2分钟
接种密度	2-4×10^4 cells/cm^2
表达蛋白/标志物	甲状腺球蛋白（TG）、甲状腺过氧化物酶（TPO）、钠/碘共转运体（NIS）；细胞角蛋白（Cytokeratin）
激素反应性	对甲状腺刺激激素（TSH）有反应；
代谢能力	保留正常甲状腺细胞的碘摄取和代谢能力
癌基因突变	无BRAF V600E或RAS突变
保存/运输条件	低温避光保存；干冰运输
可转染性	可用于构建稳定表达外源基因的细胞系
质量控制	已通过STR鉴定确认细胞系的真实性

Nthy-ori 3-1人甲状腺正常细胞培养教程

细胞复苏

• 解冻：将冻存的 Nthy-ori 3-1 细胞在 37°C 水浴中快速解冻。

• 混合：缓慢将 Nthy-ori 3-1 细胞悬液加入预热的培养基中。

• 离心：以 1000 rpm 离心 5 分钟去除冻存液，重悬 Nthy-ori 3-1 细胞。

• 接种：将 Nthy-ori 3-1 细胞接种到培养瓶中，确保均匀分布。

常规培养

• 接种密度：2-4 × 10⁴ Nthy-ori 3-1 细胞/cm²。

• 细胞形态观察：观察 Nthy-ori 3-1 细胞形态，细胞应呈圆形、椭圆形或不规则形状。

• 培养基更换：每 2-3 天更换 Nthy-ori 3-1 细胞的培养基，去除代谢废物。

传代

• 传代时机：当 Nthy-ori 3-1 细胞达到 80% 汇合度时进行传代。

• 洗涤：用无钙镁的 PBS 缓冲液轻轻清洗 Nthy-ori 3-1 细胞。

• 消化：加入适量胰酶，在 37°C 消化 1-2 分钟，轻轻拍打培养瓶，观察 Nthy-ori 3-1 细胞脱落情况。

• 终止消化：加入含血清的培养基以终止消化。

• 收集：离心收集 Nthy-ori 3-1 细胞，按 1:2 或 1:3 的比例重新接种。

细胞冻存

• 冻存液：使用 90% 培养基 + 10% DMSO 作为 Nthy-ori 3-1 细胞的冻存液。

• 细胞密度：冻存时 Nthy-ori 3-1 细胞密度约为 1 × 10⁶ cells/mL。

• 降温：缓慢降温，最终将 Nthy-ori 3-1 细胞保存在液氮中。

注意事项

• 无菌操作：确保所有操作在无菌条件下进行，以避免 Nthy-ori 3-1 细胞污染。

• 观察细胞：定期观察 Nthy-ori 3-1 细胞形态和生长状况，确保其处于最佳状态。

• 消化时长：避免过度消化，以免损伤 Nthy-ori 3-1 细胞。

• 稳定环境：保持 Nthy-ori 3-1 细胞培养条件的稳定性。

质量控制

• 纯度检测：定期进行短串联重复序列（STR）鉴定，确保 Nthy-ori 3-1 细胞系的纯度和真实性。

• 污染检测：检测可能的微生物污染，确保 Nthy-ori 3-1 细胞培养的可靠性。

Nthy-ori 3-1 细胞纯度的重要性

• Nthy-ori 3-1 细胞的纯度对培养效果和实验结果的可靠性至关重要。高纯度的 Nthy-ori 3-1 细胞能够更准确地反映人甲状腺正常细胞的特性和功能，通常规格为 1 × 10⁶ cells/T25 培养瓶。

• 高纯度的益处：高纯度 Nthy-ori 3-1 细胞有助于保持细胞的正常形态和功能，如甲状腺特异性蛋白的表达和激素反应性。

• 低纯度的风险：可能导致其他细胞类型的混入，影响 Nthy-ori 3-1 细胞的生长速度和特性表达。

• 纯度对培养参数的影响：可能需要根据 Nthy-ori 3-1 细胞的纯度调整传代比例和生长条件。