HuCCT1细胞株源自一名56岁男性患者的肝内胆管中分化腺癌，取自其腹水中的恶性细胞。HuCCT1细胞系测试结果显示，EBV、HBV、HIV-1和HIV-2均为阴性。基因变异特征：p.Lys1358fs*2 (c.4071_4072insGATT)，呈杂合子状态。

hucct1细胞特征

• hucct1细胞生长方式：贴壁生长。

• hucct1细胞具有中等侵袭性，细胞浆中表达syndecan-1蛋白。

• hucct1细胞可应用于上皮-间质转化（EMT）研究：EMT相关分子标志物（如syndecan-1和S100A4）在胆管癌侵袭转移中的作用

• hucct1细胞可用于分子机制研究：胆管癌发生、发展和转移的分子机制、S100A4在胆管癌侵袭中的作用

hucct1细胞参数表

hucct1人胆管上皮癌细胞培养教程

HuCCT1细胞传代步骤

1. 传代密度：80%-90%汇合度

2. 传代比例：1:2至1:4（根据细胞生长速度和密度决定）

具体步骤

• 弃去旧培养基，使用PBS润洗HuCCT1细胞1-2次。

• 加入1ml 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA溶液，37°C消化1-2分钟。

• 加入2-3ml完全培养基终止消化。

• 以900-1000rpm离心3-5分钟。

• 弃去上清液，用新鲜培养基重悬HuCCT1细胞。

• 按传代比例将HuCCT1细胞分配到新的培养容器中。

HuCCT1细胞复苏步骤

• 在37°C水浴中快速解冻冻存的HuCCT1细胞（约1分钟）。

• 将细胞悬液加入预热的完全培养基中。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用完全培养基重悬HuCCT1细胞，并转移到培养容器中。

• 24小时后观察HuCCT1细胞的贴壁情况，更换新鲜培养基。

HuCCT1细胞冻存步骤

• 冻存液配方：92% FBS + 8% DMSO，或92% 完全培养基 + 8% DMSO

• 冻存密度：200-300万细胞/ml，每管1ml

• 具体步骤：

• a) 收集对数生长期的HuCCT1细胞。
  b) 按传代方法处理HuCCT1细胞至离心后。
  c) 用冻存液重悬HuCCT1细胞，并轻轻混匀。
  d) 将细胞悬液分装到冻存管中，做好标识。
  e) 使用程序降温盒，放入-80°C冰箱中降温2小时，然后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 胰酶消化时间：不同品牌胰酶消化时间差异较大，需严格控制。

• 操作时轻柔：避免产生过多气泡。

• 使用低代次细胞：建议实验中使用低代次HuCCT1细胞。

• 检查细胞活性：冻存HuCCT1细胞转入液氮后，建议及时复苏一管以检查细胞活性。

• 无菌操作：在所有操作过程中保持无菌。

• 细胞适应性：复苏后的HuCCT1细胞可能需要一段时间才能恢复正常生长，建议密切观察细胞状态。可以考虑将原培养基与新配置的培养基混合使用，逐步适应新的培养条件。

• 培养过程中黑点：若HuCCT1细胞培养过程中出现黑点，需参见供应商说明以判断原因。