SMMC-7721细胞系由中国第二军医大学的董荣春教授于1977年建立，源自一名50岁男性原发性肝细胞癌患者的手术切除组织。SMMC-7721细胞系的建立旨在提供一个稳定的肝癌研究模型。细胞通过静置和旋转管法培养，经过约11天开始生长，23天后完成首次传代并具备稳定的增殖能力。SMMC-7721细胞形态为上皮样，具有贴壁生长特性，增殖初期较慢，传代后生长迅速且稳定。SMMC-7721细胞系在肝癌的基础研究和药物筛选中具有广泛应用价值。

SMMC-7721细胞特性特征

• 增殖特性：SMMC-7721细胞初代培养时细胞增殖较慢，但在传代后生长迅速且稳定。细胞呈上皮样形态，具有贴壁生长的特性。

• 簇生长：SMMC-7721细胞在培养中常表现为簇生长现象。

• 生物标志物：SMMC-7721细胞对甲胎蛋白（AFP）免疫荧光染色呈阳性，表明其与肝癌相关的特征。此外，LDH同工酶谱变化与典型肝癌细胞一致。

• 基因表达：用Northern Blot方法未能检测到SMMC-7721细胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表达，这可能与其特定的分子机制有关。

• SMMC-7721细胞在免疫缺陷小鼠体内具有较高的成瘤率，其肿瘤组织形态与原手术标本相似。这表明该细胞系能够有效模拟肝癌的生物学行为。

• 在应激反应中，SMMC-7721细胞表现出与多种应激原相关的基因表达变化。研究发现，在不同应激条件下，有53个基因的表达量显著变化，其中17个基因在G418和氯化钙处理下表现出一致的变化趋势。

SMMC-7721细胞参数表

SMMC-7721人肝癌细胞培养教程

SMMC7721细胞复苏

• 在37℃水浴中预热5 mL完全培养基。

• 从液氮中快速取出冻存的SMMC7721细胞，立即放入37℃水浴中轻轻摇晃以加速解冻（约1分钟）。

• 将解冻的SMMC7721细胞转移至15 mL离心管中，加入预热的完全培养基，轻轻混匀，随后在1000 rpm下离心5分钟，弃去上清液。

• 用2 mL完全培养基重悬细胞沉淀。

• 将重悬的SMMC7721细胞转移至T25培养瓶中，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。

• 24小时后观察SMMC7721细胞的贴壁情况，吸弃旧培养基，加入新鲜预热的完全培养基。

SMMC7721细胞传代

• 当SMMC7721细胞生长至80%-90%汇合度时，准备进行传代。

• 吸弃旧培养基，用1 mL无菌PBS洗涤细胞，以去除残余培养基及血清。

• 加入1 mL 0.25%胰酶，放入37℃培养箱消化1-2分钟，观察细胞皱缩并变圆。

• 加入1 mL完全培养基终止消化，轻轻拍打使细胞脱落成单个细胞悬液。

• 将细胞悬液收集于15 mL无菌离心管中，在1000 rpm下离心5分钟。

• 收集SMMC7721细胞沉淀，用适量的完全培养基重悬，依据需要调整接种比例（如1:2），然后转移至新的培养瓶中。

SMMC7721细胞冻存

• 按照传代方法收集SMMC7721细胞沉淀，并取少量用于细胞计数。

• 用预冷的冻存液将细胞重悬，密度为1×10^6 cells/mL。

• 将重悬的SMMC7721细胞分装至1.2 mL冻存管中，并做好标记。

• 将冻存管放入程序冻存盒，置于-80℃过夜后，再转入液氮进行长期保存。