SNU-423细胞（人肝癌细胞）

SNU-423细胞是一株人肝细胞癌细胞系，由J.-G. Park及其团队于1990年从一名韩国患者的原发性肝细胞癌中提取。患者在接受了脂质醇联合阿霉素的经导管动脉栓塞治疗后，提取了肿瘤组织进行体外培养。SNU-423细胞最初使用添加5%热灭活胎牛血清的ACL-4培养基进行培养，后续在含10%热灭活胎牛血清的RPMI 1640培养基中维持。

SNU-423细胞具有非整倍体特性，模态染色体数为79。原发性肿瘤呈单发结节形态，组织学显示为小梁型结构，而在培养中可观察到多核细胞特征。SNU-423细胞在研究肝癌的生物学特性和药物反应方面具有重要的实验价值，为肝癌的基础研究及潜在治疗方法的开发提供了有力工具。

SNU-423细胞特性特征

抗原表达：B型血抗原、Rh+（Rh阳性）
乙型肝炎病毒（HBV）检测：Southern blot杂交检测显示存在HBV DNA，但HBV基因组RNA未表达。这表明SNU-423细胞可能与HBV感染相关，但并不活跃表达HBV基因组。
SNU-423细胞系广泛用于多种研究领域，包括：肝癌的生物学研究、药物敏感性测试、癌症治疗策略开发

SNU-423细胞参数表

细胞名称	SNU-423细胞（人肝癌细胞）
细胞别称	SNU423; NCI-SNU-423
来源	韩国患者的原发性肝细胞癌；40岁男性患者，肿瘤为单结节状
建立时间	1990年由J.-G. Park及其团队建立
组织来源	肝脏
疾病类型	原发性肝细胞癌
细胞形态	上皮细胞样
生长特性	贴壁生长
倍增时间	24-48小时；每周2-3次传代
培养基	RPMI-1640 + 10% FBS + 1% PS
气体条件	95%空气；5% CO₂
温度条件	37℃
湿度条件	70%-80%
传代比例	1:2
冻存条件	冻存液：90% FBS，10% DMSO；或使用非程序冻存液
质量控制	细菌、真菌、支原体、内毒素检测
抗原表达	B型血；Rh+
分子特征	非整倍体（模态编号=79）
组织学特征	小梁型；原发肿瘤伴有结节周围延伸
细胞特性	多核细胞
用途	癌症研究、药物敏感性测试；不可用于治疗或临床应用

培养教程

SNU-423人肝癌细胞培养教程

收到SNU423细胞后的处理

收到SNU423细胞后，首先检查培养瓶是否完好，观察是否有漏液或破损现象。如果发现任何异常，应立即拍照并联系供应商。
使用75%酒精擦拭SNU423细胞培养瓶的表面，进行消毒处理。
在显微镜下检查SNU423细胞的形态，确认其是否已贴壁。
将培养瓶静置于37℃培养箱中2-3小时，确保SNU423细胞适应环境。
弃去运输过程中的旧培养基，向培养瓶中加入6mL完全培养基（RPMI-1640培养基，含10%胎牛血清和1%双抗），并轻轻摇动均匀。

SNU423细胞复苏

将冻存的SNU423细胞悬液迅速置于37℃水浴中解冻，解冻过程中轻轻摇动冻存管，确保细胞均匀解冻。
解冻后，将SNU423细胞悬液加入4mL预热的完全培养基中，混合均匀。
以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液，加入1-2mL预热的完全培养基后轻轻吹打，使SNU423细胞悬浮。
将SNU423细胞悬液转移至T25培养瓶或10cm培养皿中，加入适量培养基（约8mL），并在37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
第二天更换新鲜培养基，并在显微镜下检查SNU423细胞的生长情况。

SNU423细胞传代

当SNU423细胞覆盖培养瓶底面积的80%-90%时，可进行传代。
弃去SNU423细胞的培养上清液，用无钙镁离子的PBS缓冲液清洗1-2次。
向培养瓶中加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA混合溶液，并放置于37℃培养箱中，消化约1-2分钟。
在显微镜下观察，当SNU423细胞开始变圆并脱离培养表面时，轻轻敲击培养瓶边缘帮助细胞脱落，并加入适量完全培养基终止消化。
将SNU423细胞悬液以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液，加入1-2mL新鲜完全培养基，轻轻吹打使SNU423细胞均匀悬浮。
按1:2比例分装至新的培养瓶中，并补充8mL完全培养基。

SNU423细胞冻存

当SNU423细胞生长状态良好、密度适中时，可进行冻存操作。首先弃去培养基，用PBS清洗一次。
加入1mL胰酶消化SNU423细胞，当细胞完全脱落后，加入1mL含血清的完全培养基终止消化。
将SNU423细胞悬液以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。
加入1mL完全培养基悬浮SNU423细胞，根据细胞密度加入足量培养基和DMSO（终浓度10%），确保细胞浓度不低于1×10⁶ cells/mL。
将1mL SNU423细胞悬液分装至每支冻存管中，并确保冻存管标记清楚。
将冻存管置于程序降温盒中，缓慢降温至-80℃，2小时后转移至液氮中长期保存。