ETK-1细胞系是从一名61岁日本女性的肝内胆管癌转移性腹水中分离。ETK-1细胞最初被误认为受到了SSP-25细胞的污染，在某些文献中被错误地标记为SSP-25污染的细胞系。然而实际情况是SSP-25被ETK-1细胞系污染，而非反过来。ETK-1细胞系在研究肝内胆管癌的生物学特性及致病机制方面具有重要作用。
ETK-1细胞系通过与正常肝细胞的蛋白质组进行比较，研究人员能够识别出在肝内胆管癌中的差异表达蛋白，这对疾病标志物的发现及其潜在治疗靶点的开发具有重要意义。

ETK-1细胞参数表

ETK-1人肝内胆管癌细胞培养教程

ETK-1细胞的接收与初步处理

• 收到ETK-1细胞后，首先检查培养瓶是否有破损、漏液等异常情况。如发现问题，及时拍照并与供应商联系。

• 使用75%酒精对培养瓶外表进行消毒，确保运输中的表面污染得到清除。

• 将培养瓶静置于37℃培养箱内2-3小时，使ETK-1细胞恢复状态。

• 用显微镜检查ETK-1细胞形态，记录细胞状态并拍摄照片，确保在运输过程中未发生明显损伤。

• 观察ETK-1细胞的贴壁情况和生长密度。如果密度低于60%，可以更换培养基，加入新鲜完全培养基（6-8 mL），继续培养。

• 如果密度达到70%-80%，可以开始进行ETK-1细胞的传代。

ETK-1细胞的传代步骤

• 传代比例：根据ETK-1细胞的生长情况，一般推荐传代比例为1:2至1:4，具体比例应根据细胞的密度和状态灵活调整。

• 当ETK-1细胞的密度达到适当要求时，使用0.25%胰酶进行细胞消化，消化时间控制在2-3分钟，观察ETK-1细胞逐渐变圆和脱落。

• 消化后，加入预冷的完全培养基中和胰酶，并轻轻吹打ETK-1细胞使其完全悬浮。

• 取适量ETK-1细胞悬液，按照所需比例接种到新的培养瓶中，补充完全培养基至适当体积，继续培养。

ETK-1细胞的冻存

• 冻存液配制：冻存液由90%的胎牛血清和10%的DMSO组成，需现用现配，以保证ETK-1细胞冻存时的最佳保护效果。

• 选择对数生长期的ETK-1细胞进行冻存，确保细胞在此阶段状态最佳。

• 将收集到的ETK-1细胞悬液分装至冻存管中，标注细胞编号、日期等信息。

• 将冻存管逐步降温（可在-80℃冰箱中过夜），然后转移至液氮罐中长期保存。

注意事项

• 细胞运输：运输ETK-1细胞时需使用干冰或其他低温设备，确保运输过程中温度保持在低于-80℃的环境，避免细胞损伤。

• 细胞监控：定期使用显微镜观察ETK-1细胞的生长状态，确保细胞贴壁良好，形态正常，无污染迹象。

• 生物安全等级：ETK-1细胞属于BSL 1级别细胞，符合基础生物安全实验室的要求。