GS-HEPG2是一种由Omasa和Suga首次发现的人肝癌细胞亚型，来源于一名15岁男性的肝母细胞癌，是细胞Hep-G2细胞的亚型。与HepG2细胞系类似，该亚型细胞过表达谷氨酰胺合成酶基因（glutamine synthetase），因此在研究人工肝支持系统时具有潜在应用价值。

GS-HEPG2人肝癌细胞特性特征

• 基因表达：HepG2细胞能够表达多种与肝脏功能相关的蛋白质：白蛋白、甲胎蛋白、转铁蛋白、α2-巨球蛋白等。

• GSHEPG2细胞中还表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子II（IGF II）受体。

• 生物转化代谢酶：GSHEPG2细胞保留了完整的生物转化代谢酶，包括I相和II相酶，能够进行药物代谢和解毒。

GS-HEPG2人肝癌细胞参数表

GS-HEPG2人肝癌细胞亚型培养教程

细胞复苏步骤

• 快速解冻：将冻存的HEPG2细胞管在37°C水浴中迅速解冻，解冻时轻轻摇匀以确保均匀加热，解冻完成后应立即进行后续操作。

• 离心分离：解冻后的HEPG2细胞以800 rpm离心5分钟，去除上清液。

• 重悬细胞：使用含15%胎牛血清的DMEM培养基重悬HEPG2细胞，确保均匀分散。

• 细胞接种：将重悬后的HEPG2细胞接种于培养瓶或培养板中，每平方厘米接种1×10⁴个细胞。

• 培养条件：将HEPG2细胞置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

细胞传代步骤

• 洗涤：使用无钙镁的PBS缓冲液洗涤HEPG2细胞2-3次，去除培养基残留。

• 消化细胞：加入0.25%的胰蛋白酶溶液，置于37°C消化0.5-1分钟，观察HEPG2细胞开始变圆时终止消化。

• 终止消化：加入含有胎牛血清的培养基终止胰蛋白酶活性，并轻轻吹打HEPG2细胞，使其悬浮。

• 离心收集：将HEPG2细胞悬液以800 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 重悬与接种：使用新鲜的DMEM培养基重悬HEPG2细胞，并按照每平方厘米接种1×10⁴个细胞的密度接种至新培养瓶中。T25培养瓶建议接种密度为1×10⁴个细胞/cm²。

• 培养：将HEPG2细胞置于37°C、5% CO₂的培养箱中继续培养。

注意事项

• 空泡现象：HEPG2细胞在培养过程中可能会出现空泡，属于正常现象，不会影响其生长能力。

• 血清浓度调节：当HEPG2细胞增殖速度减慢时，可适当提高胎牛血清的浓度至15%-20%以促进生长。

• 培养基的pH值：若发现HEPG2细胞贴壁性较差，应检查培养基的pH值，若偏离正常范围应及时进行调整。

• 传代操作：在传代过程中，吹打悬浮HEPG2细胞时应尽量减少机械性损伤，控制力度和吹打次数，以减少细胞受损。

• 定期传代：应定期监测HEPG2细胞的生长状态，传代时机的选择对细胞状态的稳定性至关重要。