BEL-7402人肝癌细胞是由中国科学家陈瑞铭于1974年建立的，来源于一位53岁男性肝癌患者的手术切除标本。作为人肝细胞癌（HCC）的一种典型细胞系，BEL-7402细胞在传代过程中表现出稳定性，未发生显著的生物学改变，且具有无限传代能力，是研究肝癌发生、发展及治疗的理想模型。

BEL-7402细胞的生物学特性与原代肝癌细胞相似，显示出上皮细胞样的形态，并在培养中表现出贴壁生长和快速增殖的特性，其倍增时间约为20小时。

BEL-7402细胞特性特征

• 染色体数目不足三倍体，有一个异常的近端着丝点染色体

• bel7402细胞间接免疫荧光法检测AFP（甲胎蛋白）呈阳性反应

• LDH同工酶谱与人胚肝及临床肝癌相近，与成年人肝细胞不同

• STR检测位点与HeLa细胞相同，提示可能存在交叉污染

• 在异种移植实验中，BEL-7402细胞能够在处理过的Wistar大鼠中形成肿瘤结节，表明其具备较强的成瘤能力。

BEL-740人肝癌细胞参数表

BEL-7402人肝癌细胞培养教程

BEL-7402细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的BEL-7402细胞管，迅速置于37°C的水浴中快速融化。

• 融化后，将BEL-7402细胞悬液转移至15 mL的离心管中，并加入5 mL已预温的培养基。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，然后用5 mL培养基重悬BEL-7402细胞。

• 将重悬的BEL-7402细胞接种于T25培养瓶中，添加10 mL预温培养基。

• 将BEL-7402细胞培养瓶置于37°C、5% CO2和饱和湿度的培养箱中培养。

BEL-7402细胞常规传代

• 当BEL-7402细胞生长至80%汇合时，弃去培养基，并用PBS缓冲液洗涤细胞2次。

• 加入2 mL预温的0.25%胰酶-EDTA消化液，置于37°C下消化5-10分钟，期间通过显微镜观察BEL-7402细胞的脱壁情况。

• 当BEL-7402细胞开始脱壁时，加入5 mL培养基终止消化反应。

• 将BEL-7402细胞悬液转移至15 mL离心管中，1000 rpm离心5分钟。

• 弃去上清，用预温的培养基重悬BEL-7402细胞，并根据需要进行细胞计数。

• 按1:2到1:3的比例将BEL-7402细胞接种到新的培养瓶中，并添加适量的预温培养基继续培养。

BEL-7402细胞冻存

• 在BEL-7402细胞处于对数生长期时，将其消化成单细胞悬液，并通过离心收集细胞。

• 用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬BEL-7402细胞，并调整细胞浓度至1-2×10^6 cells/mL。

• 将BEL-7402细胞悬液分装到冻存管中，先置于-80°C冰箱过夜保存。

• 次日将BEL-7402细胞冻存管转移到液氮罐中进行长期保存。