RBE细胞系来源于一位64岁日本女性的肝内胆管癌（ICC）样本。RBE细胞能够分泌两种重要的癌症标志物——癌胚抗原（CEA）和糖类抗原19-9（CA19-9）。

RBE人肝胆管癌细胞系参数表

细胞名称	RBE细胞系（人肝胆管癌细胞系）
细胞别称	reb;
别名	人肝胆管癌细胞
来源	64岁日本女性肝内胆管癌患者
形态	上皮样
生长特性	贴壁生长
种属	人源
组织来源	肝胆管
培养基	RPMI-1640 + 10%胎牛血清
抗生素	G/A（庆大霉素-两性霉素B混合溶液）
培养环境	37°C；95%空气，5%二氧化碳
传代时间	约3天可长满培养皿
换液频率	根据细胞生长情况决定
传代比例	根据细胞生长情况决定
分泌物	CEA（癌胚抗原）、CA19-9（糖类抗原19-9）
辐射研究	可用于质子辐射的剂量依赖性相对生物效应（RBE）
安全检测	支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性
病原体检查	HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性
生物安全	建议在二级生物安全台内操作
冻存条件	使用细胞保存液，液氮存储
STR鉴定	已通过
应用领域	癌症研究、药物筛选、辐射生物学研究

RBE人肝胆管癌细胞系培养教程

RBE细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的RBE细胞，迅速解冻以保持RBE细胞的活力。

• 将解冻后的RBE细胞悬液转移至含有预热培养基的培养瓶中。

• 轻轻摇晃培养瓶，以确保RBE细胞均匀分布。

RBE细胞的常规培养

• RBE细胞为贴壁生长，呈上皮细胞样形态。

• RBE细胞通常在3天内会长满培养皿。

• 根据RBE细胞生长情况，每2-3天更换一次培养基。

RBE细胞的传代步骤

• 当RBE细胞生长至80-90%汇合度时，进行传代。

• 吸除旧培养基，用PBS轻轻清洗RBE细胞1-2次。

• 加入适量的胰酶-EDTA溶液，37°C消化3-5分钟以分离RBE细胞。

• 轻轻拍打培养瓶，观察RBE细胞是否脱落。

• 用含血清的培养基终止消化。

• 收集RBE细胞悬液，1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清，用新鲜培养基重悬RBE细胞。

• 按1:2或1:3的比例，将RBE细胞分装至新的培养瓶中，添加适量的新鲜培养基，并放入CO₂培养箱中继续培养。

防止RBE细胞污染

• 定期使用硫酸铜溶液擦拭CO₂培养箱内部以防止RBE细胞污染。

• 在培养箱水盘中加入饱和硫酸铜溶液或消毒磷酸氢二钠高盐液体，以防霉菌污染RBE细胞。

RBE细胞培养注意事项

• 操作时需在生物安全柜内进行，以保持RBE细胞的无菌环境。

• 定期观察RBE细胞形态和生长状况，避免RBE细胞过度生长或长期处于高密度状态。

• 定期进行支原体等污染检测，以确保RBE细胞的纯净。

RBE细胞污染常见症状

• 细菌污染：培养基浑浊，RBE细胞生长减慢或停止，RBE细胞形态异常。

• 酵母和真菌污染：培养基表面出现白色或黑色斑点，培养基混浊，RBE细胞生长受阻。

• 支原体污染：RBE细胞生长减慢，RBE细胞形态变异，如细胞变小或圆形，RBE细胞核染色质边缘化。

预防RBE细胞霉菌污染

• 定期清洁和消毒RBE细胞培养箱及工作台。

• 在培养箱水盘中添加饱和硫酸铜或消毒磷酸氢二钠高盐液体，以防霉菌滋生。

• 在生物安全柜内进行所有RBE细胞操作，使用无菌耗材和试剂，并定期更换培养基。