Mahlavu 人肝癌细胞是源自人肝癌组织的上皮细胞系。是一种具有贴壁生长特性的肿瘤细胞系。

mahlavu细胞参数表

mahlavu人肝癌细胞培养教程

细胞复苏

• 将含有1 mL Mahlavu细胞悬液的冻存管放入37℃水浴中迅速摇晃解冻。

• 加入4 mL预热的完全培养基，混合均匀。

• 在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液。

• 补充1-2 mL预热的完全培养基，轻轻吹匀。

• 将细胞悬液均匀分配至含6-8 mL完全培养基的培养瓶中或6 cm培养皿中，37℃培养过夜。

细胞传代

• 当细胞密度达到80%-90%时，可进行传代。

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加入1 mL消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA），置于37℃培养箱中消化1-2 min。

• 观察细胞变圆并开始脱落后，加入2-3 mL含10% FBS的完全培养基终止消化。

• 将消化后的细胞悬液收集至无菌离心管中，1000 rpm离心5 min。

• 弃去上清液，补充1-2 mL完全培养基后吹匀。

• 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL完全培养基的新皿中，继续培养。

细胞冻存

• 当细胞生长至80%覆盖培养瓶表面时，进行冻存操作。

• 弃去培养上清，用PBS清洗细胞一次。

• 添加1 mL0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶中，37℃消化1-2 min后加入3-4 mL完全培养基终止消化。

• 将细胞悬液收集至离心管中，1000 rpm离心5 min。

• 用适量的冻存液（FBS：DMSO=9:1）重悬细胞，分装至冻存管中，每支冻存管中加入1 mL细胞悬液。

• 将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转移到液氮保存。