HCT116-Luc细胞（人结肠癌细胞荧光素酶标记）

HCT 116-Luc细胞系是一种应用于癌症研究和药物筛选的人源结肠癌细胞系，具有荧光素酶标记。hct116-luc细胞源自一名男性结肠癌患者的肿瘤组织，最早由M. Brattain等人在1979年成功分离。

hct116-luc细胞属于恶性肿瘤细胞类型，源于结直肠癌，呈现典型的上皮样形态，并以贴壁方式生长。在半固体琼脂糖培养基中可形成克隆。此外，在无胸腺裸鼠模型中，HCT 116-Luc细胞显示出显著的致瘤性，能够形成上皮样的肿瘤结构，常被用于肿瘤生物学相关的实验。

HCT 116-Luc细胞特有的生物发光功能。此标记是通过慢病毒介导的基因转染，将荧光素酶（luc）基因导入细胞内，从而在特定底物（如D-荧光素）存在时产生发光效应。该特性为活体成像提供了便利，使研究人员可以在实验过程中实时监测肿瘤的增殖、转移以及药物干预效果，显著提升了成像及实验数据的直观性和可靠性。

HCT 116-Luc细胞特性特征

生长特性：hct116-luc细胞在半固体琼脂糖培养基中能够形成克隆，并在无胸腺裸鼠中具有致瘤性，能够形成上皮样肿瘤。
荧光素酶标记：hct116-luc细胞通过慢病毒转染技术引入了荧光素酶（luc）基因，使其在存在底物（如D-荧光素）时发光。这一特性使得该细胞系在活体成像和肿瘤监测中具有重要应用。
基因特征:hct116-luc细胞的基因组中包含与结肠癌相关的多种突变。例如，该细胞系通常携带K-Ras基因的突变，这在许多结肠癌病例中常见

HCT 116-Luc细胞参数表

细胞名称	HCT116-Luc细胞（人结肠癌细胞荧光素酶标记）
细胞别称	HCT-116-Luc; HCT.116-Luc; HCT_116-Luc; HCT116-Luc
来源	人类结肠癌细胞系，来源于一名男性结肠癌患者的肿瘤。
细胞形态	上皮样细胞，呈多边形，贴壁生长，能够在培养基中形成克隆。
致瘤性	具有致瘤性，能够在无胸腺裸鼠中形成上皮样肿瘤结节。
细胞密度	通常在复苏和传代时保持在1×10^6至1×10^7个细胞/mL。
规格	可在T25培养瓶或1 mL冻存管中培养和冻存。
培养基	使用McCoy's 5A作为基础培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（双抗）。
传代比例	建议传代比例为1:2至1:4，即每次传代将细胞悬液分配到新的培养瓶中。
培养条件	温度保持在37°C，二氧化碳浓度为5%，空气浓度为95%。
湿度	培养箱内湿度需保持在70%-80%。
冻存液组成	冻存液为90%胎牛血清与10%二甲基亚硫酰胺（DMSO）的混合物，用于细胞冻存。
药物筛选浓度	推荐使用嘌呤霉素（Puro）浓度为0.25 µg/ml，以维持Luciferase表达。
分子特征	经过慢病毒转染引入荧光素酶（luc）基因，使细胞具备生物发光能力。
基因突变特征	常见K-Ras基因突变，这种突变在许多结肠癌病例中普遍存在，影响细胞信号通路的调控。
运输方式	细胞可通过干冰运输或常温运输，根据细胞状态选择合适的运输方式。
复苏步骤	在37°C水浴中快速解冻冻存管中的细胞，然后加入预热的完全培养基以终止解冻过程。
观察要求	在显微镜下观察细胞状态，检查细胞贴壁情况和生长密度，以确保健康状态。
特殊备注	为了维持Luciferase荧光素酶基因表达量的稳定，建议在传代时使用含有嘌呤霉素的培养基。
特殊备注	收到细胞后至少传3代后再进行实验，以确保细胞的稳定性和一致性。

培养教程

HCT 116-Luc人结肠癌细胞荧光素酶标记培养教程

hct116-luc细胞的复苏

复苏hct116-luc细胞前，将水浴锅预热至37°C。
准备5 mL完全培养基至15 mL离心管中备用。
从液氮或-80°C冰箱中取出hct116-luc细胞冻存管，立即放入37°C的水浴中，轻轻摇晃以加速解冻（控制时间约为1分钟）。
将解冻的hct116-luc细胞悬液加入到预热的培养基中，轻轻混匀后以1000 rpm离心3-5分钟。
小心吸弃上清液，保留hct116-luc细胞沉淀。
用2 mL完全培养基轻柔地重悬hct116-luc细胞，并转移至T25培养瓶中。
做好标记，放入37°C、5% CO₂的培养箱中培养。
复苏后的hct116-luc细胞培养24小时后，观察贴壁情况，吸去旧培养基并更换新鲜预热的完全培养基。

hct116-luc细胞的传代

传代时机：hct116-luc细胞培养密度达到80%-90%时，可进行传代操作。
弃去旧培养基，并用无钙镁的PBS轻轻冲洗hct116-luc细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液（T25瓶使用1-2 mL），置于37°C培养箱中消化1-2分钟。
显微镜下观察hct116-luc细胞消化情况，细胞变圆并脱落后，迅速加入3-4 mL含10% FBS的培养基终止消化。
吸出细胞悬液，以1000 rpm离心3-5分钟后弃去上清。
用新鲜完全培养基重悬hct116-luc细胞，并按1:2的比例分配到新的T25瓶中培养。

hct116-luc细胞的冻存

按照传代方法消化并收集hct116-luc细胞至离心管中，并使用计数板确认细胞密度，推荐冻存密度为1×10^6至1×10^7个活细胞/mL。
使用90%完全培养基和10% DMSO混合制成hct116-luc细胞冻存液。
用预冷的冻存液重悬hct116-luc细胞，将其分装到1.2 mL冻存管中，每管约含1×10^6个细胞。
将冻存管置于程序降温盒内，先在-80°C冰箱中过夜，随后转入液氮罐中储存。

注意事项

收到hct116-luc细胞后应检查运输状态，若有异常情况需立即联系供应商。
运输过程中的培养基不可用于细胞培养，应更换新鲜配制的完全培养基。
在复苏和传代hct116-luc细胞时，避免过多机械损伤，以提高细胞存活率和实验效果。