OVCAR5细胞系是1980年代由美国国立癌症研究所（NCI）从一名67岁未经治疗的晚期卵巢癌患者的腹水中建立。OVCAR5细胞在癌症研究和药物开发领域中广泛使用。尽管OVCAR5细胞最初被认为是源自卵巢癌，近年来的研究表明其可能来源于胃肠道组织，而非卵巢。OVCAR5细胞不仅在癌症的侵袭性生长研究中表现突出，还为探索胃肠道癌的生物学特性提供了重要的工具。

OVCAR5细胞特性特征

• 基因突变：OVCAR-5细胞在KRAS基因中存在纯合的Gly12Val突变，突显了其较强的迁移和侵袭能力。

• 生物标志物：OVCAR5细胞过度表达claudin-4，这是一种与癌症恶性程度相关的重要标记物，参与细胞间的粘附和屏障功能。

• 细胞增殖：OVCAR-5细胞在适宜的培养条件下（如RPMI-1640培养基、10%胎牛血清）能够快速增殖，适合用于体外实验和药物筛选。

• 侵袭性：OVCAR5细胞表现出高侵袭性，适合用于研究转移机制及治疗耐药性

OVCAR5细胞参数表

OVCAR5人转移性胃肠癌细胞培养教程

OVCAR5细胞培养步骤

• 从液氮中取出冻存的OVCAR5细胞，立即在37℃水浴中解冻，约1-2分钟，期间轻轻摇动冻存管。

• 解冻后迅速将OVCAR5细胞转移到含有RPMI-1640和10%胎牛血清的培养基中，以减少DMSO的毒性影响。

• 以1000 rpm离心5分钟，去除上清液。

• 加入新鲜的RPMI-1640培养基重悬OVCAR5细胞，确保细胞均匀分布。

• 将重悬的OVCAR5细胞按1×10⁶ cells/mL的密度接种到T25或T75培养瓶中。

• 将培养瓶放入37℃培养箱中孵育，确保OVCAR5细胞的正常生长。

• 每日通过显微镜观察OVCAR5细胞生长状态，检查是否有细菌或真菌污染。

• 每3-4天更换一次培养基，调整传代比例为1:2到1:6，确保OVCAR5细胞在最佳状态下继续增殖。

细胞传代

• 当OVCAR5细胞的汇合度达到70%-80%时，进行传代。

• 使用无钙镁PBS清洗OVCAR5细胞后，加入0.25%胰蛋白酶消化细胞2-3分钟。

• 当观察到OVCAR5细胞开始脱落时，加入含有FBS的培养基中和胰蛋白酶，轻轻吹打细胞以确保完全脱离。

• 通过离心去除胰蛋白酶后，将OVCAR5细胞重悬于新鲜培养基中，并接种到新的培养瓶中。

细胞冻存

• 在OVCAR5细胞处于对数生长期时，收集细胞并用90%胎牛血清+10% DMSO的冻存液重悬。

• 将OVCAR5细胞分装到冻存管中，先在-80℃冰箱中预冷24小时，随后转移至液氮中长期保存。