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.jpg) |
| 产品名称:SW948细胞(人结肠腺癌细胞) |
| 产品详细说明 |
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来源:结肠腺癌
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细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
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培养基:Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S 或DMEM+10% FBS+1% P/S
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其他:癌症基因:myc+;myb+;ras+;fos+;p53+;sis;abl-;ros;src- ;抗原表达:O型血;Rh+
SW948细胞系来源于一位81岁白人女性患者的结肠腺癌。SW948细胞系取自其结肠组织,具体为Dukes C级III型结肠腺癌。SW948细胞表现出上皮样形态,用于研究结肠癌的机制与治疗方法。
SW948细胞特性特征
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致瘤性:sw948细胞在裸小鼠中具有致瘤性;皮下接种107个细胞后,21天内以100%频率(5/5)形成肿瘤
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癌基因表达:c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb和fos呈阳性、p53基因呈阳性;未检测到N-myc和sis癌基因表达、abl和src基因呈阴性
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抗原表达:血型:O型血;Rh阳性、角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性
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基因表达:癌胚抗原(CEA):7ng/106个细胞/10天;结肠特异性抗原(CSAp):750单位/0.5mL细胞超声处理液;
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通过免疫过氧化物酶染色,细胞角蛋白呈阳性。
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同工酶特征:ES-D,1;G6PD,B;PEP-D,1;PGD,A;PGM1,1-2;PGM3,1-2
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细胞贴壁偏紧聚团生长,传代时消化时间需延长;
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有漂浮细胞和间隙空泡存在,是细胞正常特性,非细胞状态异常。
SW948细胞参数表
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细胞名称
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SW948细胞(人结肠腺癌细胞)
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细胞别名
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SW948 (SW-948, SW 948)
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来源
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人源结肠癌(81岁白人女性)
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疾病类型
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结肠腺癌(Dukes C型III级)
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形态/生长方式
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上皮型,贴壁生长
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培养基
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方案1:培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃,
方案2:培养基:Leibovitz's L-15+10% FBS+1%P/S
气相:空气,100%, 温度:37℃
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致瘤性
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裸小鼠中21天内100%致瘤
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血型
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O型;Rh+
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抗原表达
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CEA: 7ng/106细胞/10天; CSAp: 750单位/0.5mL
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蛋白表达
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角蛋白阳性(免疫过氧化物酶染色)
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癌基因表达
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阳性: myc, myb, ras, fos, p53
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阴性: sis, abl, src
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同工酶特征
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ES-D,1; G6PD,B; PEP-D,1; PGD,A; PGM1,1-2; PGM3,1-2
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STR鉴定
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正确
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培养教程
SW948人结肠腺癌细胞培养教程
SW948细胞的传代步骤
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观察汇合度:当SW948细胞达到80-90%汇合度时进行传代。
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清洗:用PBS轻轻清洗SW948细胞单层。
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消化:加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C孵育2-5分钟。
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终止消化:加入等体积含血清的培养基,终止消化过程。
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离心:以1000rpm离心5分钟,收集SW948细胞。
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接种:按1:3或1:4的比例将SW948细胞重新接种到新的培养瓶中。
换液频率
SW948细胞冻存
SW948细胞复苏
常见问题及解决方案
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细胞生长缓慢或停滞
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原因:SW948细胞的培养基成分不适、血清质量差、培养条件不合适。
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解决方法:检查并更换培养基和血清,确保培养条件符合要求(37°C,5% CO2只适用于DMEM体系)。
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细胞污染
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原因:操作不当、培养基或器具污染。
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解决方法:严格无菌操作,定期更换培养基,使用经过灭菌处理的器具。
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细胞形态改变
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原因:SW948细胞的培养条件不适、细胞过度传代、污染。
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解决方法:调整培养条件,避免过度传代,定期监测细胞形态。
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细胞贴壁不良
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原因:培养基成分不适、SW948细胞消化不完全或过度消化。
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解决方法:优化培养基成分,控制胰酶消化时间,确保细胞适当贴壁。
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细胞死亡率高
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原因:冻存和复苏过程不当、培养基成分不适、污染。
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解决方法:优化冻存和复苏步骤,确保培养基成分适当,严格无菌操作。
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细胞传代问题
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原因:SW948细胞的传代比例不当、细胞密度过高或过低。
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解决方法:根据SW948细胞的生长情况调整传代比例,保持适当的细胞密度。
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细胞特性变化
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原因:长期传代、基因突变、污染。
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解决方法:定期进行SW948细胞特性鉴定(如STR分析),确保细胞系的纯度和真实性。
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角蛋白表达减弱
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原因:细胞状态不佳、传代次数过多。
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解决方法:优化培养条件,限制传代次数,保持SW948细胞的特性。
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细胞冻存和复苏问题
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原因:冻存液配制不当、降温速率不合适、复苏过程不当。
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解决方法:使用正确的冻存液(90%培养基+10%DMSO),缓慢降温至-80°C后转移至液氮中,快速解冻并缓慢加入预热培养基。
STR鉴定及相关
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Amelogenin
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X
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CSF1PO
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12
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D2S1338
|
17,24
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D3S1358
|
16
|
|
D5S818
|
11
|
|
D7S820
|
9,11
|
|
D8S1179
|
12,14
|
|
D13S317
|
10,11
|
|
D16S539
|
11,12
|
|
D18S51
|
19
|
|
D19S433
|
13,15
|
|
D21S11
|
25.2,29
|
|
FGA
|
24
|
|
Penta D
|
12
|
|
Penta E
|
13
|
|
TH01
|
6,9.3
|
|
TPOX
|
8,11
|
|
vWA
|
16,18
|
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