NCI-H716细胞系是一种人源结直肠腺癌细胞系，于1984年从一名33岁白人男性结直肠腺癌患者的盲肠腹水中分离。该患者在细胞系建立前接受过5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗。ncih716细胞系表现出淋巴母细胞样形态，是一种亚二倍体人类细胞系。

NCI-H716细胞系细胞特性

染色体特征

• 模态数为61，范围为55到64

• 模式染色体数目61出现在28%的细胞中

• 高倍体率为1.2%

• 每个细胞中有12条标记染色体，包括t(7q, 16q)、t(5p, 7p)等

• 每个细胞中都发现大量双微染色体(DM)

• 21号染色体缺失；9、11、13、20、22号染色体和X染色体为单拷贝

• Q带载玻片制备中未检测到Y染色体

生长特性

• 半贴壁半悬浮生长

• 细胞形态：上皮细胞样，主要呈悬浮状态，少量贴壁，部分细胞形成聚团

• 倍增时间：约50小时

生化特性

• 含有多巴脱羧酶

• 细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒

• 不表达TAG-72或CA19-9抗原

• 不产生癌胚抗原(CEA)

同工酶谱

• AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1-2; Me-2, 1; PGM1, 1; PGM3, 1-2

致瘤性

• 在裸小鼠中具有强烈致瘤性。皮下注射1×10^7个细胞后，21天内100%（5/5）的裸鼠形成肿瘤。

NCI-H716细胞系参数表

细胞名称	NCI-H716细胞系 (人结直肠腺癌细胞系)
细胞 别称	NCI-H716 ; NCI H716; h716; H-716; NCIH716
种属组织来源	人（Homo sapiens）; 盲肠；结直肠腺癌
患者信息	33岁白人男性
建系时间	1984年
建系前处理	5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗
细胞类型	癌细胞；腺癌细胞
生长特性	半贴壁半悬浮生长
细胞形态	上皮细胞样，主要悬浮，少量贴壁，部分形成聚团
特殊形态	淋巴母细胞样
倍增时间	约50小时
基础培养基	RPMI-1640+10% FBS+青霉素/链霉素（PS）
培养环境	37°C，5% CO2
传代比例	1:3-1:4
换液频率	每周2-3次
冻存液成分	55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO；液氮
复苏方法	37°C水浴，快速解冻
特殊酶	多巴脱羧酶
细胞内颗粒	核心致密的内分泌型颗粒
抗原表达	不表达TAG-72、CA19-9、CEA
同工酶谱	AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1, PGM3
致瘤性	裸小鼠中表现出强烈的致瘤性，接种10^7个细胞的裸鼠在21天内以100%的频率形成肿瘤
药物敏感性	5-FU：已经过治疗，可能存在耐药性
生物安全等级	BSL-1
支原体检测	阴性
细胞代数	10代以内
保藏信息	ATCC（编号CCL-251）; 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
主要用途	结直肠癌研究、肠道内分泌功能研究、药物筛选和评估、肿瘤生物学研究

NCI-H716人结直肠腺癌细胞系培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出NCI-H716细胞冻存管，迅速在37°C水浴中解冻

• 解冻后，立即将细胞悬液转移至预热的培养基中以最大限度地保持细胞活力

• 通过1000rpm的离心步骤清除冻存液，然后重新悬浮细胞并转移至预先准备好的培养瓶中

日常培养

• 每隔2-3天更换一次培养基，以维持细胞在70-80%的密度范围内生长

• 定期观察细胞的形态和生长状态，确保细胞健康和培养条件的维持

细胞传代

• 收集NCI-H716细胞的悬浮部分，轻柔地吹洗培养瓶底部以收集轻度贴壁的细胞

• 通过1000rpm的离心步骤清除旧培养基，然后将细胞重新悬浮并按照1:3-1:4的比例传代到新的预热培养瓶中

细胞冻存

• 收集对数生长期的NCI-H716细胞以确保最佳冻存效果

• 准备适合细胞的冻存液：含55%基础培养基，40% FBS和5% DMSO

• 调整细胞密度至1-5×10^6 cells/mL后，分装细胞悬液至冻存管中，先放置于-80°C过夜，随后长期存储于液氮罐中

注意事项

• NCI-H716细胞主要以悬浮生长为主，少量贴壁，传代时需特别注意收集悬浮细胞以确保细胞健康和一致性

• 定期检查细胞的形态和生长状态，确保细胞培养条件的稳定性和无菌性

• 细胞代数不应过高，建议在10代以内使用细胞以保持其生物学特性和实验结果的一致性