来源:肺;肿瘤分期:Ⅲ期;疾病:表皮瘤;取材转移灶:肋膜
细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
培养基:生长培养基:McCoy's 5a+10% FBS+1% P/S
其他:抗原表达:血型A;Rh+;HLA A10、A11、B15、Bw35
Calu-1人肺癌细胞是一种表现出上皮形态的细胞系,从一名47岁的患有表皮样癌的白人男性患者的肺中分离。Calu-1细胞主要用于癌症研究、毒理学。
Calu-1细胞染色体数目为亚三倍体,模态染色体数目为62,存在7个频繁出现的标记物,包括M1(每个细胞两个拷贝),M6和M7在大多数细胞中发现;M2和M3、M4和M5分别互斥存在,即每个细胞中仅有M2或M3中的一个以及M4或M5中的一个。
Calu-1细胞系来源于男性,但通过QM带检查未检测到Y染色体。
Calu-1细胞具有致瘤性,在裸鼠身上形成表皮样癌,在类固醇治疗的仓鼠中形成转移。
Calu-1细胞表现出血型A和Rh+抗原表达,并具有HLA A10、A11、B15、Bw35的抗原谱。同工酶分析显示其具有AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,1-2;PGM1, 1-2;PGM3,1的同工酶谱。
Calu-1细胞具有众多微绒毛、显著的粗面内质网(RER)、溶酶体和脂包含体,且不含有病毒颗粒。Calu-1细胞含有ras(H-ras和K-ras)癌基因。
calu-1细胞特性
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Calu-1细胞源自一名47岁白人男性患者的肺鳞癌胸腔积液转移病灶。
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上皮形态:表现出上皮细胞样的形态。
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超微结构特征:包括大量微绒毛、突出的粗面内质网 (RER)、溶酶体、脂质内含物,无病毒颗粒。
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分子特征:含有ras(H-ras)癌基因。
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生物学特性:级性:亚三倍体,模态染色体数目为62。
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染色体变异:2S组分出现率为14.2%,7个标记物频繁出现。
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致瘤性:在裸鼠中能够形成表皮样癌。
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转移性:在类固醇治疗的仓鼠中能形成转移。
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抗原表达:血型A;Rh+;HLA A10、A11、B15、Bw35。
calu-1细胞参数表
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细胞名称
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Calu-1(人肺癌细胞)
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别称
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CaLu-1, CALU-1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1
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细胞货号
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SNL-278
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来源
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肺鳞癌;胸腔积液转移;47岁白人男性患者
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细胞形态
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上皮细胞样
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细胞类型
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肿瘤细胞
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生长特性
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贴壁生长
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生物安全等级
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1
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致瘤性
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在裸鼠中形成表皮样癌;在类固醇治疗的仓鼠中形成转移
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染色体特性
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亚三倍体,模态染色体数目为62,2S组分出现率为14.2%,7个频繁出现的标记物。QM带检查未检测到Y染色体。
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免疫学特征
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抗原表达:血型A;Rh+;HLA A10、A11、B15、Bw35
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同工酶
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AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,1-2;PGM1, 1-2;PGM3,1
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分子特征
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含有ras(H-ras)癌基因
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超微结构特征
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大量微绒毛、显著的粗面内质网 (RER)、溶酶体、脂质内含物,无病毒颗粒
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培养基
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McCoy's 5A + 10% FBS + 1% P/S
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培养环境
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37℃, 5% CO2, 饱和湿度
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传代方法
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1:2至1:6,每周2次
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冻存条件
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90%完全培养基+10% DMSO,液氮储存
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倍增时间
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37-50小时
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推荐换液
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每周2-3次
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支原体检测
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阴性
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保藏机构
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ATCC(HTB-54)
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应用领域
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3D细胞培养、癌症研究、高通量筛选、毒理学实验、转染宿主
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培养教程
calu-1人肺癌细胞培养
传代步骤
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细胞密度:当Calu-1细胞密度达到80%-90%时即可进行传代培养。
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弃去培养上清:用不含钙、镁离子的PBS润洗Calu-1细胞1-2次。
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消化细胞:加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Calu-1细胞消化情况。若Calu-1细胞大部分变圆并脱落,迅速取回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
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离心处理:按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
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传代:收到Calu-1细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。
冻存步骤
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准备细胞:Calu-1细胞冻存时,弃去培养基后,用PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,待Calu-1细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化。可使用血球计数板计数。
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离心处理:4分钟1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬Calu-1细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为5%,细胞密度不低于1x10^6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
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冻存:将冻存管置于程序降温盒中,放入-80℃冰箱,至少2小时后转入液氮罐储存。记录冻存管位置以便下次取用。
STR鉴定及相关
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Amelogenin
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X
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CSF1PO
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10
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D2S1338
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16,17
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D3S1358
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17
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D5S818
|
10,12
|
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D7S820
|
9,10
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D8S1179
|
10
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D13S317
|
11,12
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D16S539
|
11
|
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D18S51
|
14,17
|
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D19S433
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13,15
|
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D21S11
|
28
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FGA
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20,21
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Penta D
|
9
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Penta E
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11
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TH01
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9,9.3 (ATCC=HTB-54; CLS=300141; PubMed=25877200)
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9.3 (ECACC=93120818)
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TPOX
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8
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vWA
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15,16
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