COLO 320DM人结直肠腺癌细胞是从一名患有结直肠腺癌的55岁白人女性患者的结肠中分离出的圆形折射细胞系。

COLO 320DM细胞为超二倍体，模态数为24，范围在49到61之间，常见9到11条标记染色体（包括M1、M2、M3、M5、M10、M11、M12、M13、M14、7p-和10q+）。在24%的检查中期中观察到两分钟染色体。

该细胞具有致瘤性。

COLO 320DM细胞表达血清素、去甲肾上腺素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素（ACTH）和甲状旁腺激素。同工酶分析显示为ES-D 1型、G6PD B型、PEP-D 1型、PGD A型、PGM1 1型和PGM3 2型。

抗原检测结果表明，COLO 320DM细胞对CEA、CSAp和结肠抗原3呈阴性。而角蛋白和波形蛋白则呈弱阳性。COLO 320DM细胞具有双微染色体（DM chromosomes）。

COLO 320DM细胞特性

• COLO 320DM细胞形态: 圆形折射细胞

• 染色体数目: 超二倍体，常见9-11条标记染色体，包括7p-和10q+，模态数=24，范围=49到61

• COLO 320DM细胞具备致瘤性

• 基因表达: 血清素、去甲肾上腺素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素、甲状旁腺激素

• 同工酶: ES-D、G6PD、PEP-D、PGD、PGM1、PGM3

• 抗原特性: CEA、CSAp、结肠抗原3呈阴性；角蛋白和波形蛋白呈弱阳性

COLO 320DM细胞参数表

COLO 320DM细胞培养

传代方法

• 收集悬浮的COLO 320DM细胞：将培养瓶中的悬浮COLO 320DM细胞收集到离心管中。

• 润洗COLO 320DM细胞：用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于COLO 320DM细胞贴壁不牢，PBS润洗后细胞会脱落，PBS也要回收到离心管中。

• 加入0.25%（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 在显微镜下观察细胞消化情况，若COLO 320DM细胞大部分变圆并脱落，迅速取出培养瓶，轻敲几下后加入3-4ml含10%FBS的培养基终止消化。

• 将收集到的悬浮COLO 320DM细胞、PBS清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀。

• 将细胞悬液按1:2的比例分到新的T25瓶中，添加6-8ml新的完全培养基以保持细胞的生长活力。

• 后续传代根据实际情况按1:2至1:5的比例进行。

冻存步骤

• 收集COLO 320DM细胞：按照细胞传代的过程收集消化好的COLO 320DM细胞到离心管中。

• 计数COLO 320DM细胞：使用血球计数板计数，决定细胞的冻存密度。推荐冻存密度为1×10^6~1×10^7个活细胞/ml。

• 离心：1000rpm离心3-5分钟，去掉上清。

• 重悬COLO 320DM细胞：用配制好的细胞冻存液重悬细胞。按每1ml冻存液含1×10^6~1×10^7个活细胞/ml分配到冻存管中。

• 标记：标注好名称、代数、日期等信息。

• 降温：将冻存管置于程序降温盒中，在-80℃冰箱中过夜。之后转入液氮容器中储存，并记录好冻存管在液氮容器中的位置。