COLO 205人结肠癌细胞由T·U·Sample等人于1957年从一名患有结肠癌的70岁白人男性的腹水中分离而建系。取样前，该患者已接受5-氟尿嘧啶治疗4-6周。

COLO205细胞系特性

• COLO205细胞是上皮细胞类型，具有超三倍体染色体组，常见的标记染色体包括M1、M2、M4、M5、M6以及其他5条，多数为单体状态。

• COLO 205细胞在裸鼠中具有致瘤性，以1×10^7个细胞皮下接种能在21天内形成肿瘤，频率为100% (5/5)。

• 基因表达包括癌胚抗原（CEA）1.5至4.1ng/10^6细胞/10天，角蛋白，白细胞介素10（IL-10），并且COLO205细胞对角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性。

• COLO 205细胞源自与COLO 201相同患者的组织，表达与GA733-2肿瘤相关抗原相关的36kD细胞表面糖蛋白。

• COLO205细胞在CSAp（细胞表面抗原）方面呈阴性反应。

• 同工酶：ES-D，1-2；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1, 1-2；PGM3，1-2

• COLO 205细胞表达与GA733-2肿瘤相关抗原相关的36000道尔顿细胞表面糖蛋白。

COLO205细胞系参数表

COLO205细胞系培养

传代方法

• 收集COLO 205细胞的悬浮细胞到离心管中，用不含钙、镁离子的PBS润洗1-2次。由于细胞贴壁不牢，PBS润洗后细胞会脱落，所以PBS也要回收到离心管中。

• 加入0.25% (w/v) 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中 (T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL)，37℃培养箱中消化1-2分钟。观察COLO 205细胞消化情况，细胞大部分变圆并脱落时加入3-4mL含10%FBS的培养基终止消化。

• 将悬浮细胞、PBS清洗液中的COLO 205细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpm离心5分钟，弃去上清。补加1-2mL培养液重悬混匀，按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL完全培养基。

• 传代比例推荐1:2到1:5，每2-3天换液。

细胞冻存

• 冻存液: 55%基础培养基 + 40%FBS + 5%DMSO

• 将COLO 205细胞按上述配方制备冻存液，置于液氮中储存。

细胞复苏

• 解冻：在37°C水浴中轻柔摇动解冻COLO 205细胞，约2分钟。取出后用70%乙醇消毒。

• 移液：将COLO 205细胞移入含9mL完全培养基的离心管中，以约125 x g离心5-7分钟。

• 重悬：将COLO 205细胞重悬于推荐的完全培养基中，避免培养基碱化。建议在加入COLO 205细胞前将培养基在培养箱中放置至少15分钟以达到正常pH（7.0-7.6）。

• 培养：37°C培养箱中培养，推荐5% CO₂环境。