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您的当前位置:首页 > 产品信息 > 人源细胞系 > HGC-27-Luc(未分化人胃癌细胞株荧光素酶标记)
产品名称:HGC-27-Luc(未分化人胃癌细胞株荧光素酶标记)
产品详细说明
  • 来源:胃,淋巴结转移
  • 细胞特征:贴壁细胞,肿瘤细胞
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:人未分化胃癌细胞,带Luciferase(荧光素酶)基因稳定表达

HGC-27-Luc细胞是在HGC-27细胞系的基础上构建。HGC-27细胞分离自一位未分化型胃癌患者的淋巴结转移灶,能分泌黏液素,具备典型的胃癌生物学特征。HGC-27-Luc细胞是利用慢病毒载体将萤火虫荧光素酶(Luciferase)基因导入HGC-27细胞,并经过稳定筛选,实现持续表达荧光信号。HGC-27-Luc细胞不仅保留了原始细胞的形态学与肿瘤学特性,还具备光学成像功能,能够在体内外实验中用于实时追踪肿瘤的发生与发展。HGC-27-Luc细胞携带Luc基因。

HGC-27-Luc细胞特性特征

  • hgc-27-luc细胞能够分泌黏液素,体现胃癌的分泌特性。

  • hgc-27-luc携带慢病毒转染的Luciferase(Luc)基因,能稳定表达荧光素酶,用于体内外肿瘤成像。

  • P53基因表达阴性,hgc-27-luc细胞缺失P53蛋白的正常表达功能。

  • 高表达某些癌症相关蛋白,如SPHK1(鞘氨醇激酶1),其在胃癌细胞中与肿瘤的迁移和侵袭能力相关。

  • hgc-27-luc能分泌黏液素,这是一种胃癌细胞常见的分泌分子,反映肿瘤黏液特性。

  • hgc-27-luc含有通过慢病毒载体稳定导入的Luc基因,便于进行活体光学影像分析。

  • 癌症相关转录因子及信号通路相关分子在hgc-27-luc细胞中也得到研究,如NF-κB信号通路调控相关基因影响细胞迁移和侵袭

HGC-27-Luc细胞参数表

细胞名称 HGC-27-Luc(未分化人胃癌细胞株荧光素酶标记)
英文名称 HGC-27/Luciferase (HGC-27-Luc)
种属来源 人类
组织来源 胃癌患者淋巴结转移组织
细胞形态 上皮细胞样,贴壁生长
发育状态 未分化胃癌
荧光素酶表达 稳定携带Luciferase基因,用于活体肿瘤成像
P53表达状态 阴性
其他基因表达 高表达SPHK1等与迁移、侵袭相关分子
培养基 DMEM + 10%胎牛血清 + 1%青链霉素
培养温度 37℃
培养气体环境 5% CO2,95%空气;湿度70%–80%
传代比例 1:2 至 1:4(首次传代建议1:2)
传代频率 每周传代2-3次
换液频率 每周2-3次
传代方法 胰蛋白酶消化(0.25%胰蛋白酶+0.53mM EDTA,1-2分钟)
冻存条件 90%胎牛血清 + 10%DMSO,液氮中保存
抗药筛选 用嘌呤霉素1-5 μg/mL维持Luc表达,逐步筛选
支原体检测 阴性
STR鉴定 通过,与ATCC、DSMZ等细胞库匹配
主要用途 体内外实时肿瘤成像,胃癌机制研究,药物筛选,基因功能分析
适用模型 动物裸鼠肿瘤模型
运输处理 运输用培养基不用于正常培养,复苏需新配培养基
细胞维护 收到细胞后建议传代3代后检测Luc荧光强度及筛选维持表达

培养教程

HGC-27-Luc人胃癌细胞株培养教程

细胞复苏

  • 从液氮罐中取出hgc-27-luc细胞冻存管,立即置于37℃水浴中轻轻摇晃,约1–2分钟直至冰晶完全融化。

  • 将细胞悬液转移至含10 mL预热完全培养基(DMEM + 10% FBS + 1%青链霉素)的离心管中。

  • 1000 rpm(约300 g)离心5分钟,弃去上清以去除DMSO。

  • 将hgc-27-luc细胞轻轻重悬于5–10 mL新鲜完全培养基中。

  • 转移至25 cm²培养瓶,置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。

  • 24小时后更换培养基,去除死亡细胞;待细胞贴壁及状态稳定后进入常规传代。

细胞传代

  • 吸去旧培养液,用PBS轻轻冲洗hgc-27-luc细胞1–2次,去除残留血清。

  • 加入0.25%胰酶-EDTA(含0.53 mM EDTA)约1–2 mL,置37℃孵育1–2分钟,直至细胞边缘变圆、开始脱落。

  • 轻轻吹打使细胞完全悬浮。

  • 加入2–3倍体积完全培养基终止消化。

  • 按1:2–1:4比例分瓶接种至新培养瓶,补充适量完全培养基。

  • 将hgc-27-luc细胞放入培养箱继续培养,每48–72小时换液一次。

细胞冻存

  • 在对数生长期、状态良好时收集hgc-27-luc细胞。

  • 胰酶消化并离心,弃去培养基。

  • 配制冻存液:90% FBS + 10% DMSO。

  • 将hgc-27-luc细胞重悬后调整密度至1×10⁶–5×10⁶ cells/mL。

  • 分装至冻存管,每管约1 mL。

  • 使用程序降温盒(约-1℃/min),先于-80℃保存12–24小时,再转入液氮长期保存。

注意事项

  • hgc-27-luc细胞在冻存和复苏过程中应快速操作,减少DMSO毒性。

  • 复苏后应及时更换培养基,促进细胞恢复。

  • 传代时避免过度胰酶消化,以免损伤细胞。

  • 保持无菌操作,防止细菌、真菌或支原体污染。

  • hgc-27-luc细胞携带Luc基因,随传代次数增加荧光信号可能减弱,应使用嘌呤霉素筛选以维持稳定表达

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