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产品名称:Fu97细胞(人胃癌细胞系)
产品详细说明


  • 来源:
  • 细胞特征:贴壁细胞, 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S+10mg/L Insult
  • 其他:三氧化二砷(As2O3)可下调FU97细胞中AFP、VEGF、STAT3基因的表达
FU-97细胞是一种来源于人类胃癌的上皮样细胞系,最初分离自一名 66 岁日本女性胃癌患者,其术前血清中甲胎蛋白(AFP)水平高达 2266 ng/mL,并伴有淋巴结及胰腺转移。Fu97细胞贴壁生长,具有稳定的微卫星状态(MSS),可高水平分泌 AFP,并已进行外显子测序、蛋白质组学、DNA 甲基化分析、SNP 阵列、转录组分析(微阵列及 RNA-Seq)及反向蛋白质阵列等多组学研究。


FU-97 细胞推荐培养于高葡萄糖(4.5 g/L)杜尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM),并需补充 10% 胎牛血清(FBS)及 10 mg/L 胰岛素,倍增时间通常在 72 小时左右,不同批次可能在 30-34 小时范围内波动。

Fu97细胞常用于胃癌发病机制研究、药物筛选及抗癌治疗探索,例如三氧化二砷对其增殖抑制及凋亡诱导的研究。FU-97 细胞在基因靶向治疗研究中也具有重要应用,例如构建针对 STAT3 基因的 siRNA 表达载体,可在该细胞中实现高效沉默,探索其在胃癌治疗中的潜在作用。

Fu97细胞由 ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell 及 PromoCell 等多个国际生物资源库提供,并广泛用于胃癌相关的基础及转化研究。

Fu97细胞特性特征

  • 细胞形态和生长方式:FU97细胞是上皮样细胞,贴壁生长。

  • AFP表达:产生高水平的AFP(甲胎蛋白)。棕黄色颗粒沉着代表甲胎蛋白表达阳性.

  • 微卫星稳定性: 稳定 (MSS)

  • 对药物的反应:三氧化二砷(As2O3) 对FU97细胞有体外抑制增殖和诱导凋亡的作用。

  • 侵袭能力:表达DKK1的AFP阳性胃癌细胞,FU97细胞的侵袭能力会增强,伤口愈合试验证实。

  • 可用于基因治疗研究:针对AFP基因的siRNAs表达质粒是可用于AFP相关胃癌的治疗物质,能显著抑制肿瘤细胞生长并能诱导其凋亡,可进一步研究AFP基因的功能及在实验动物体内进行基因治疗研究。

  • 多组学分析:已进行多组学分析,包括深度外显子分析、深度定量蛋白质组分析、DNA甲基化分析、SNP阵列分析、转录组分析(通过微阵列和RNAseq)以及反向蛋白质阵列的蛋白质表达分析。

  • STAT3抑制:靶向STAT3基因的siRNA表达载体,在胃癌细胞系FU97中表达STAT3特异性siRNA分子,可特异性抑制STAT3基因的表达。

  • 凋亡:转染后48h,Annexin V/PI双染色法检测FU97凋亡结果显示,pDonor Vector-AFP1/2/3的%Gated分别为46.69%、42.79%、38.48%,而空白对照为23.31%,说明排除坏死细胞外,有相当一部分为晚期凋亡细胞,且pDonor Vector-AFP1作用后诱导的晚期凋亡细胞最多

Fu97人胃癌细胞系参数表

细胞名称 Fu97细胞(人胃癌细胞系)
细胞别名 FU97; FU-97
种属 人 (Homo sapiens)
组织
细胞类型 上皮样细胞
人种性别 日本女性
供体年龄 66岁
疾病 胃癌,胃腺癌
细胞形态 上皮细胞样
生长特性 贴壁
微卫星不稳定性 稳定 (MSS)
AFP 表达 产生高水平的AFP
背景资料

2266ng/ml AFP observed before the operation.

Lymph node metastasis and pancreatic metastasis observed. ss, ssINFbehta, ly3, v0

培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S+10mg/L Insult
倍增时间

approx. 34 hrs1~72 小时3,也可见报道不同批次有所不

如Lot 08072007约为30小时,Lot 02022011约为34小时,Lot 03132015约为31小时

CO2 浓度 5%
培养温度 37°C
传代方法 胰蛋白酶-EDTA消化1,1:3传代,3-4天传1代2
冻存条件 90% FBS + 10% DMSO
pH值 7.2~7.4
内毒素含量 (EU/mL) ≤10
细胞培养验证 合格
无菌检测 细菌:阴性,真菌:阴性,支原体:阴性
病毒检测

GAPDH(+),CMV(-),EBV(-),HHV6(-),HHV7(-),BKV(-),JCV(-),ADV(-),parvoB19(-),

HBV(-),HTLV1(-),HTLV2(-),HIV1(-),HIV2(-),HPV18(-)

同工酶分析 Confirmed as human by NP, G6PD (typeB), MD
资源识别 Fu97 (RRID:CVCL_2908)
来源说明

细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、

JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

相关研究 癌症发病机制的研究,药物研发和筛选,探索治疗方法
Omics分析

Array-based CGH, 深度外显子分析, 深度定量蛋白质组分析, DNA甲基化分析,

 蛋白质表达 by reverse-phase protein arrays, SNP array analysis, 转录组分析 by microarray, 转录组分析 by RNAseq


培养教程

Fu97人胃癌细胞系培养教程

细胞复苏

  • 预热37℃水浴锅。

  • 在超净工作台内准备好完全培养基。

  • 取出FU97细胞冻存管,75%酒精消毒后迅速放入37℃水浴锅解冻。

  • 轻轻摇晃冻存管,使FU97细胞迅速解冻(约1-2分钟)。

  • 立即用1mL移液枪吸取细胞悬液,转移至含9mL完全培养基的15mL离心管。

  • 1200 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 重新加入10mL新鲜培养基,轻轻重悬FU97细胞。

  • 将细胞转移至培养瓶中,置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。

细胞传代

  • 每2~3天更换一次新鲜培养基,确保FU97细胞正常生长。

  • 观察细胞生长状态,FU97细胞达80-90%汇合时进行传代。

  • 吸去旧培养基,PBS洗涤2次。

  • 加入适量0.25%胰酶(含EDTA),室温消化约1-2分钟,轻敲瓶壁助细胞脱落。

  • 加入完全培养基终止消化,轻轻吹打混匀FU97细胞。

  • 1200 rpm离心5分钟,弃去上清,重悬细胞。

  • 1:3~1:5比例进行传代,重新加入新鲜培养基,置于培养箱中继续培养。

细胞冻存

  • FU97细胞生长状态良好时(对数生长期),可进行冻存。

  • 收集细胞,1200 rpm离心5分钟。

  • 弃去上清,加入冻存液(90% FBS+10% DMSO),混匀FU97细胞。

  • 4℃放置10分钟。

  • -20℃放置1小时。

  • -80℃保存24小时后转移至液氮长期储存。

  • 按照1×10⁶~5×10⁶个细胞/mL的浓度分装至冻存管。

  • 逐步降温

注意事项

  • 操作时保持无菌,避免FU97细胞污染。

  • 胰酶消化时间不宜过长,以免损伤FU97细胞。

  • 冻存液需现配现用,确保FU97细胞存活率。

  • 定期监测FU97细胞状态,确保细胞形态及增殖能力正常。

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