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产品名称:NCI-N87细胞(人胃癌细胞)
产品详细说明
  • 来源:胃;肝转移灶
  • 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:NCI-N87细胞系为myc阳性和erb-B2阳性,表面表达癌胚抗原(CEA)和TAG 72,但为左旋多巴脱羧酶(DDC)阴性。

NCI-N87是一种人胃癌细胞系,表现出上皮样形态,于1976年从一名男性胃癌患者的胃中(肝转移灶)分离。NCI-N87细胞系为近二倍体,64%的受检细胞中存在双微体(DM)。据报道,NCI-N87细胞的镀覆效率为4.3%。

NCI-N87细胞具有以下特性和特征

分子特征

  • 表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72

  • 缺乏左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性

  • 血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低

  • 缺乏胃泌激素受体

  • 表达蕈毒碱胆碱受体

基因表达特征

  • 不表达N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素释放肽基因

  • c-myc和c-erb-B2 RNA表达水平与其它细胞株相当

其他特征

  • 生长特性:上皮细胞样、贴壁生长、倍增时间:约48-80小时

  • 受体表达:表达乙酰胆碱受体,特别是蕈毒碱型受体

  • 致瘤性:NCI-N87细胞在裸鼠中可形成肿瘤

NCI-N87细胞参数表

细胞名称 NCI-N87细胞(人胃癌细胞)
细胞 别称 NCI-N87 [N87] ; NCI-N87
细胞类型 人 (Homo sapiens) ; 肿瘤细胞 ; 胃癌细胞
组织来源 男性胃癌,肝转移
形态生长特性 上皮细胞样; 贴壁生长
培养基 RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
培养条件 37°C,5% CO2
培养参数 推荐传代比例 1:2-1:3;推荐换液频率 2~3次/周;倍增时间 ~48-80小时
冻存条件 冻存液:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存
细胞解冻温度 37°C水浴,快速解冻
生物安全等级 1
致瘤性 在无胸腺裸鼠中可形成肿瘤
转移性 具有肝脏转移性
植板率 4.30%
受体表达 表达蕈毒碱胆碱受体
分子标记 表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72
酶活性 缺乏左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性
VIP受体活性 极低
胃泌素受体 缺乏
基因表达 阳性表达 c-myc, c-erb-B2;阴性表达 N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 胃泌素释放肽
未扩增或重排基因 N-myc, L-myc, myb, EGF受体基因
保藏机构 / 建系时间 ATCC; CRL-5822 / 1976年
应用领域 胃癌研究,药物筛选,信号通路研究


NCI-N87人胃癌细胞培养教程

NCI-N87细胞复苏步骤

  • 在37°C水浴中预热完全培养基30分钟,以备NCI-N87细胞使用。

  • 将冻存的NCI-N87细胞从液氮中取出,放入-80°C冰箱数分钟以过渡。

  • 在37°C水浴中快速解冻NCI-N87细胞,时间约1-2分钟。

  • 将解冻的NCI-N87细胞悬液转移到含有5 mL预热完全培养基的15 mL离心管中。

  • 以1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 用1 mL完全培养基重悬NCI-N87细胞。

  • 将NCI-N87细胞悬液转移到培养瓶中,并补充适量的完全培养基。

  • 将NCI-N87细胞置于37°C,5% CO2培养箱中培养。

NCI-N87细胞传代

  • 传代比例:1:2至1:4

  • 传代周期:5-7天

  • 贴壁时间:由于NCI-N87细胞贴壁较慢,建议在复苏或传代后让细胞贴壁48小时再进行后续实验操作。

NCI-N87细胞换液频率

  • 每周换液2-3次,以避免NCI-N87细胞过密生长和培养基pH值变化。

  • 定期观察培养基颜色,如果变黄则表明pH值降低,需要及时更换培养基。

NCI-N87细胞培养的特殊注意事项

  • 培养NCI-N87细胞时可能会有漂浮细胞和碎片,属正常现象。

  • 换液时可轻轻吸除上层漂浮细胞和碎片,但避免完全去除,以免影响贴壁的NCI-N87细胞。

  • 传代时可使用PBS轻轻冲洗NCI-N87细胞表面以去除大部分漂浮物。

  • NCI-N87细胞贴壁较慢,传代后需要足够时间贴壁。

  • 可能观察到较大的"囊泡",这是NCI-N87细胞的特征之一。

NCI-N87细胞冻存

  • 冻存液配方:95%完全培养液 + 5% DMSO

  • 保存条件:建议使用液氮进行长期保存NCI-N87细胞。

STR鉴定及相关

Amelogenin X,Y
CSF1PO 8,12
D1S1656 16
D2S441 11,12
D2S1338 23,24
D3S1358 14
D5S818 12,13
D6S1043 12
D7S820 10,11
D8S1179 14,15
D10S1248 13
D12S391 16,21
D13S317 8,11
D16S539 9,13
D18S51 17
D19S433 14,14.2
D21S11 30
D22S1045 14,15
DYS391 10
FGA 20,21
Penta D 12
Penta E 5
TH01 7,9 (PubMed=27102572)

9 (AddexBio=C0023002/4674; ATCC=CRL-5822; CCRID; Cosmic-CLP=908461; 

Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200)

TPOX 9,11
vWA 15,16
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