MKN-45细胞系由Hojo H于1976年建立,源自日本一名62岁患有低分化胃腺癌女性患者的肝转移灶。该细胞系曾感染支原体,并通过MC-210处理成功消除。
MKN-45细胞在扫描电镜下显示为相当扁平的形态,细胞表面覆盖有大量微绒毛,细胞边缘存在长线状的细胞质突起,相邻细胞通过桥粒相连接。在光学显微镜下,MKN-45细胞呈圆形,表现为半贴壁半悬浮生长,有时会松散堆积。细胞排列不规则,生长中的细胞边缘不太清晰。
MKN-45细胞特性、基因表达等
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分子特征:表达野生型p53蛋白、c-met原癌基因扩增、E-钙粘蛋白(E-cadherin)启动子存在突变
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基因特征:p16CDKN2A/MTS1/INK4A基因纯合缺失、p15INK4B/MTS2基因纯合缺失
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MKN-45细胞表现出正常及化生的胃粘膜表型、保持一定的分化能力
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染色体数目为67~71
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MKN-45细胞扫描电镜显示细胞表面有大量微绒毛、细胞边缘有长线状的细胞质突起、相邻细胞通过桥粒连接
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MKN-45细胞为半贴壁半悬浮生长、生长过程中容易成团
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MKN-45细胞适用于裸鼠荷瘤实验,可形成侵袭性生长的皮下肿瘤
MKN-45细胞参数表
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细胞名称
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MKN-45细胞(人胃癌细胞)
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简称
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Human gastric cancer cell line ; MKN-45
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组织来源
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胃;腺癌细胞;低分化胃腺癌肝转移灶
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建立信息
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1976年由Hojo H建立,非ATCC细胞系
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患者信息
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62岁日本女性
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细胞形态
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圆形,上皮细胞样 / 细胞大小约15-20μm / 核质比约1:2
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生长特性
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半贴壁半悬浮
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细胞表面/连接
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大量微绒毛,长线状细胞质突起 / 相邻细胞通过桥粒连接
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染色体数目/倍性
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67~71 / 非整倍体
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基因状态
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p53野生型,p16和p15缺失,c-met扩增,E-cadherin启动子突变
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微卫星不稳定性
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MSI-L(低度微卫星不稳定)
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培养基
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RPMI-1640 / 10% FBS / 1% P/S
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培养环境
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37°C,5% CO2,95%湿度,pH 7.2-7.4
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传代/换液
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比例1:3-1:4 / 2-3次/周
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消化方法
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0.25% 胰蛋白酶-EDTA,2-3分钟
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倍增时间
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约30-60小时
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培养容器
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T25, T75, 6孔板, 96孔板等
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冻存液/温度
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55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO / -196°C
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复苏方法
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37°C水浴,快速解冻
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鉴定/检测
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STR已通过,支原体/细菌/真菌/HIV-1/HBV/HCV阴性
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体外实验
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药物筛选,信号通路研究,基因功能研究,3D培养
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体内实验
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裸鼠荷瘤模型,可形成侵袭性生长的皮下肿瘤
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上皮标记
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E-cadherin, EpCAM, CK8, CK18
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胃癌标记
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CEA, CA19-9, MUC1
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其他标记
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c-Met (高表达), VEGF, HER2 (低表达)
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药物敏感性
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5-FU和顺铂中度敏感,紫杉醇低敏,多西他赛中敏
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主要通路状态
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PI3K/AKT活化,MAPK部分活化,Wnt/β-catenin正常
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代谢特征
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葡萄糖消耗高;乳酸产生高;谷氨酰胺依赖性中;
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侵袭转移能力
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体外迁移中等,侵袭强 ; 体内裸鼠肺转移能力中等
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表面标记
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CD44阳性,CD133部分阳性
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成球能力
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成球能力中等
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γ射线敏感性
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中度敏感 (D0: 约2Gy)
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培养注意点
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易成团,消化需控制,用预处理培养皿,80-90%汇合度传代
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血清批次效应
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可能敏感,建议批次验证
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安全等级
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BSL-2
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专利状态
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无相关专利限制
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原始文献
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Hojo H. (1977). Niigata Igakkai Zasshi. 91:737-763.
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