MKN-28细胞是从一名70岁的女性胃癌患者(患有中分化胃癌)的肿瘤组织中分离出来的。MKN-28细胞系是由JCRB（日本癌症研究资源银行）建立。

MKN-28细胞具有肠分化的形态学特征，在体外和裸鼠中都表现出细胞极性和带有核心丝的微绒毛。已知MKN-28细胞系在p53（I251L）和APC肿瘤抑制基因中具有突变。

细胞特性：

• 形态特征： MKN-28细胞呈上皮细胞样形态，具有贴壁生长的特点，在培养基表面附着并生长。

• 生长特性： 这些细胞在适宜的培养条件下能够迅速增殖，形成大量细胞群。

• 遗传背景： MKN-28细胞与MKN74细胞具有相似的遗传背景，可做遗传学研究。

MKN28人胃癌细胞产品参数表

细胞名称	MKN-28细胞 (人胃癌细胞)
英文名称	MKN-28 Cell
细胞又名	MKN28细胞, MKN 28
细胞来源	从一名70岁女性胃癌患者的肿瘤组织中分离
细胞形态	上皮细胞样
生长特性	贴壁生长
培养基	RPMI-1640，90%；FBS，10%。
生长条件	气相：空气，95%；二氧化碳，5% 温度：37 ℃
传代方法	1：2至1：4，每周2-3次
冻存条件	40% FBS+5% DMSO的培养基，液氮储存
支原体检测	阴性
形态特征	肠分化形态学特征，体外和裸鼠中表现出细胞极性和带有核心丝的微绒毛
遗传背景	与MKN74细胞具有相似的遗传背景
倍增时间	约28-36小时

培养基和试剂

• 培养基：RPMI-1640

• 补充剂：10% 胎牛血清（FBS）

• 消化液：0.25% Trypsin-EDTA

• 冻存液：90% FBS + 10% DMSO

• 其他：PBS（含钙、镁离子的无血清PBS）

培养条件

• 气相条件：95% 空气，5% 二氧化碳

• 温度：37 ℃

MKN28细胞培养步骤

1 细胞复苏：

• 将含有1mL MKN28细胞悬液的冻存管在37℃水浴中快速解冻。

• 加入5-9mL培养基混合均匀。

• 在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液。

• 补加4-6mL完全培养基后吹匀。

• 将所有MKN28细胞悬液加入培养瓶中培养过夜，或加入6cm皿中，继续培养过夜。

2 MKN28细胞传代：

• 当MKN28细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代培养。

• 弃去培养上清，用PBS润洗细胞1-2次。

• 加入1-2ml消化液（0.25% Trypsin-EDTA），置于37℃培养箱中消化1-2min。

• 在显微镜下观察MKN28细胞消化情况，若绝大多数细胞变圆并脱落，迅速加入含10%血清的完全培养基终止消化。

• 吹打细胞，完全脱落后离心5分钟。

• 弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

• 按5-6ml/瓶补加培养液，根据需要将MKN28细胞悬液按1：2到1：4的比例分到新的培养皿中。

MKN28细胞冻存

• 冻存细胞时，使用40% FBS + 5% DMSO的培养基配制的冻存液，并梯度降温后将MKN28细胞置于液氮存储。

培养注意事项

• 严格无菌操作，确保培养过程中的细菌和真菌污染最小化。

• 定期检查MKN28细胞密度和形态，及时进行传代或冻存以维持细胞健康和活性。

• 培养瓶在培养箱内培养时，瓶盖略微松开以避免过度气压。

安全注意事项

• 操作过程中需佩戴个人防护装备，避免接触培养基和MKN28细胞悬液。

• 涉及到生物危害性的操作需在二级生物安全柜内进行。