MKN-7细胞是一种人类胃腺癌细胞系，最早由Hojo等人于1989年从一位39岁男性患者的高分化胃管状腺癌淋巴结组织，是研究胃癌生物学和治疗的重要模型。MKN-7细胞系的特征是扩增c-erbB2癌基因和细胞周期蛋白E基因。

MKN-7人胃癌细胞产品参数表

MKN-7人胃癌细胞应用

• MKN-7细胞被广泛应用于胃癌的研究领域，包括疾病发生机制、治疗策略的评估、药物筛选和癌症信号通路的研究等。

• 由于其高表达c-erb B2的特性，MKN-7细胞也被用作研究胃癌相关信号通路的理想模型。

培养基配制：

• 使用RPMI-1640培养基，并添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

• 培养基的配制过程中要严格遵循无菌操作。

传代步骤：

1. 当细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代培养。

2. 弃去培养上清，使用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

3. 加入2ml含0.25%Trypsin-0.53mM EDTA的消化液至培养瓶中，置于37°C培养箱中消化1-2分钟。

4. 在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

5. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

6. 接下来的传代可根据实际情况按1:2至1:3的比例进行。

冻存步骤：

1. 弃去培养基后，使用PBS润洗细胞1次。

2. 加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

3. 离心5min，1000rpm，去掉上清液。加入1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入适量血清和DMSO，轻轻混匀，使DMSO终浓度为5%。

4. 将细胞悬液冻存于冻存管中，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意做好标识。

5. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80°C冰箱，至少2小时后转入液氮存储。

注意事项：

• MKN-7细胞生长速度较慢，正常培养5-7天可进行一次传代。

• 传代时贴壁形态展开较大，传代比例建议为1:2。

• 细胞在显微镜下观察时，轮廓有时不清晰，调整显微镜亮度或采用相差镜可改善观察效果。

• 由于细胞消化较难控制，建议使用优质胰酶消化，并在细胞脱落后及时终止消化。

• 需注意培养密度，MKN-7细胞推荐稍高细胞浓度接种。

• DMSO稀释会产生热量，注意先稀释DMSO至2X，再与细胞悬液混匀分装至冻存管中。