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产品名称:OE19细胞(人食管癌细胞)
产品详细说明
  • 来源:食管癌
  • 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:抗原表达:组成型表达HLA-A、HLA-B和HLA-C(MHC I类抗原); 用干扰素-γ处理后诱导ICAM-1(CD54)的表达

OE19细胞系(也称为JROECL19细胞)是人类食管腺癌(EAC)细胞系之一,最初由华威大学和伯明翰心脏医院的科研团队于1993年从一名72岁男性患者的III期食管腺癌肿瘤组织中建立。该肿瘤位于患者贲门及食管-胃交界处,并表现为中度分化的腺癌类型。OE19细胞系具有良好的体外培养特性,细胞在适宜条件下能快速增殖,并显示出典型的上皮细胞形态特征。OE19常用于食管鳞癌和腺癌的病理机制研究及治疗策略的开发。

在食管腺癌细胞系建立初期,五种永久性人类食管腺癌细胞系(包括SEG-1、BIC-1、SK-GT-5等)被广泛应用。然而,后续研究发现其中三种细胞系实际来源并非食管腺癌,而是其他癌种,例如SEG-1被重新鉴定为大细胞肺癌H460,BIC-1被鉴定为结直肠癌SW620,而SK-GT-5被认为是胃底腺癌SKGT-2。相较之下,OE19与OE33、FLO-1、KYAE-1、OACP4C、OACM5.1、ESO26及ESO51等细胞系的来源得到了验证,并被确认是食管腺癌细胞系。目前,所有经过验证的EAC细胞系及其基因分型信息已被存储在欧洲细胞与组织培养中心(ECACC),供全球科研人员用于基础研究和药物开发。

OE19细胞特性特征

抗原表达

  • 组成型表达HLA-A、HLA-B和HLA-C抗原(MHC I类)。

  • 用干扰素-γ处理后,诱导ICAM-1(CD54)的表达。

  • 仅在OE19亚群中测量到HLA-DR(MHC II类)的表达。

  • 细胞角蛋白:OE19细胞表达上皮细胞角蛋白,显示出其上皮来源的特性。

基因表

  • 在不同实验条件下,OE19细胞中Gli1、Gli2、Snail、E-cadherin和Cyclin D1等基因的表达存在显著差异。这些基因与肿瘤的侵袭性和转移性相关。

  • Western blot分析显示,这些蛋白在不同处理组之间有统计学显著差异。

应用

  • 致瘤性:在裸鼠模型中显示出致瘤性,为研究食管癌的生物学行为提供了理想的模型。

  • 药物开发:用于筛选新药物及评估其对食管癌的治疗效果

OE19细胞参数表

细胞名称 OE19细胞(人食管癌细胞)
别称 OE-19; JROECL 19; JROECL19; OEC19
性别/年龄 男性;72岁
组织来源 食管/胃贲门
肿瘤类型 食管腺癌
病理分期 III期 (UICC)
细胞类型 肿瘤细胞
形态学特征 上皮样
生长方式 贴壁生长为单层
倍增时间 ~50-60小时
生物安全等级 BSL-1
无菌检测结果 细菌、酵母、支原体检测均为阴性
病原体检测 HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性
培养基组成 RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 双抗
培养条件 温度:37℃;气相:95%空气,5%二氧化碳;湿度70%-80%
冻存条件 90% 胎牛血清 + 10% DMSO
保存条件 液氮存储
致瘤性 在裸鼠中具有致瘤性
基因表达特征 表达HLA-A、HLA-B和HLA-C抗原(MHC I类);ICAM-1(CD54)诱导表达;HLA-DR表达仅在特定条件下测量。
蛋白表达特征 Gli1、Gli2、Snail、E-cadherin和Cyclin D1等蛋白在不同处理组间有显著差异。
保藏机构 ECACC; 96071721
供应限制 仅供科研使用

培养教程

OE19人食管癌细胞培养教程

收到OE19细胞后的处理

  • 收到OE19细胞后,首先检查运输瓶和培养基的完整性。如果发现培养液漏液或浑浊,需及时拍照并联系供应商。

  • 将装有OE19细胞的T25培养瓶从包装中取出,去掉封口膜后,放入37℃培养箱中平衡2-3小时,使OE19细胞适应环境温度。

  • 小心弃去OE19细胞培养瓶中的旧培养基,换上6ml全新的完全培养基,确保OE19细胞获得足够的营养。

  • 观察OE19细胞的生长状态,当细胞密度达到80%-90%时,及时进行传代操作。

  • 接收OE19细胞的次日,需对细胞进行污染检查。如果发现任何污染迹象,立即联系供应商以获得支持。

复苏OE19细胞

  • 从冻存管取出OE19细胞后,迅速将其置于37℃水浴中晃动,直至OE19细胞完全解冻,确保无冰晶残留。

  • 在超净工作台内,将解冻后的OE19细胞转移至含6ml完全培养基的15ml离心管,1000rpm离心4分钟。

  • 弃去上清后,用6ml完全培养基重悬OE19细胞,然后将其接种于T25培养瓶中,在37℃、5% CO₂的培养箱中培养。次日更换培养基并检查OE19细胞的密度和生长状态。

OE19细胞传代

  • 当OE19细胞覆盖培养瓶80%的面积时,弃去培养基,并用无钙镁的PBS清洗1-2次。

  • 加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,放入37℃培养箱中消化1-2分钟。观察OE19细胞的形态,若大多数细胞变圆并开始脱附,迅速加入少量完全培养基终止消化。

  • 将消化后的OE19细胞悬液离心处理,1000rpm离心4分钟后弃去上清。然后将OE19细胞重悬,并按1:2或1:4比例接种到新的T25培养瓶中,补加8ml完全培养基,继续培养OE19细胞。

冻存OE19细胞

  • 在传代过程中,收集OE19细胞并离心处理,弃去上清后用PBS清洗OE19细胞一次。

  • 用无血清冻存液重悬OE19细胞,加入DMSO使终浓度为10%。OE19细胞悬液的密度应保持在1x10^6至1x10^7/ml,每支冻存管冻存1ml OE19细胞悬液。

  • 将OE19细胞冻存管置于程序降温盒中,放入-80℃冰箱中过夜,随后转移至液氮罐中长期保存。冻存时应记录OE19细胞的具体位置,以便后续使用。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 11,13
D2S1338 18,19
D3S1358 15,18
D5S818 11,14
D7S820 8
D8S1179 13,15
D13S317 9,11
D16S539 12,13
D18S51 12 (PubMed=25877200)
12,13 (DSMZ=ACC-700; PubMed=20075370)
D19S433 13
D21S11 30
FGA 23,26
Penta D 9
Penta E 5,8
TH01 8,9
TPOX 8
vWA 16,17 (Cosmic-CLP=910079; ECACC=96071721)
16,17,18 (DSMZ=ACC-700; PubMed=20075370; PubMed=25877200)
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