KYSE520细胞系源自一名58岁日本女性的中分化浸润性食管鳞癌，在治疗前通过下胸腔内的食管切除术获得。该肿瘤已侵袭到动脉外膜，属于第二期。KYSE520细胞系是食管最常见的癌症类型之一，起源于食管内表面的扁平细胞。

在细胞特性方面，KYSE520细胞呈上皮样形态，通常以单层生长，偶尔可观察到约1%的多核巨细胞，生长方式为贴壁生长。KYSE520细胞为研究食管鳞癌的生物学特性和治疗策略提供了重要的实验模型。

KYSE520细胞特性特征

• 基因突变: KYSE520细胞携带p53基因突变，这是一种常见的肿瘤抑制基因突变，通常与癌症的发展相关。

• 癌基因扩增: KYSE520细胞系中MYC癌基因的扩增被观察到，MYC是一个重要的转录因子，与细胞增殖、代谢和肿瘤发生密切相关。

• 细胞表面标志物: KYSE520细胞表达食管鳞癌相关的特定标志物，这些标志物在研究中有助于识别和分析肿瘤细胞的特性。

• 核型分析: KYSE520细胞显示出人类平坦模式的低三倍体核型，并伴有8%的多倍体现象。这种遗传不稳定性常见于癌症细胞，有助于其适应恶劣环境

KYSE520细胞参数表

KYSE520人食管鳞癌细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮罐中取出冻存管，将其迅速置于37°C的水浴中摇晃解冻，直到完全解冻。

• 向解冻的KYSE-520细胞中加入4mL RPMI-1640培养基（含10% FBS），轻轻混合均匀。

• 在1000 rpm的条件下离心4分钟，去掉上清液。

• 补加1-2mL培养基后，轻轻吹打混匀KYSE-520细胞悬液。

• 将细胞悬液转移至T25培养瓶中，或加入约8mL培养基至10cm培养皿中，培养过夜。

• 次日更换培养基并检查KYSE-520细胞的生长状态和密度。

细胞传代

• 当KYSE-520细胞生长密度达到80%-90%时，可以进行传代培养。

• 弃去培养基，使用无钙镁PBS清洗细胞1-2次。

• 加入1mL的消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53mM EDTA）至培养瓶中，置于37°C的培养箱中消化1-2分钟。

• 在显微镜下观察细胞，待KYSE-520细胞大部分变圆并脱落后，迅速取出培养瓶，轻轻敲打后加入少量培养基终止消化。

• 按照6-8mL/瓶的比例补加培养基，轻轻混匀后进行离心，在1000 rpm下离心4分钟。

• 弃去上清液，补加1-2mL培养基，轻轻吹匀KYSE-520细胞悬液。

• 将细胞悬液以1:2至1:3的比例分配至新的培养瓶或培养皿中，含8mL培养基。

细胞冻存

• 当KYSE-520细胞生长状态良好且达到传代要求时，可以进行细胞冻存。

• 首先弃去培养基，用PBS清洗KYSE-520细胞一次。

• 加入1mL胰蛋白酶，待细胞变圆并脱落后，加入1mL含血清的培养基终止消化。

• 在1000 rpm条件下离心4分钟，去掉上清液。

• 加入1mL血清重悬细胞，并根据细胞数量加入90% FBS和10% DMSO，轻轻混合均匀。

• 每支冻存管中冻存1mL KYSE-520细胞悬液，细胞密度应不低于1×10^6/mL。

• 将冻存管放入程序降温盒中，置于-80°C冰箱中冷冻2小时，然后转移至液氮罐中储存。