KYSE-150细胞是一种人类食管鳞状细胞癌细胞，来源于一位49岁日本女性。该患者在接受放射治疗后，从其上食道切除的低分化鳞状细胞癌组织中分离。KYSE-150细胞成为研究食管癌及其治疗的重要模型。

KYSE150细胞特性特征

基因扩增：KYSE150细胞携带扩增的致癌基因，包括c-erb-B（8倍扩增）和cyclin D1（4倍扩增）。

肿瘤形成能力：KYSE-150细胞在裸鼠中能够产生肿瘤，证明其具有良好的肿瘤形成能力。

KYSE150细胞参数表

KYSE150人食管鳞癌细胞培养教程

KYSE150细胞培养步骤

• 将冻存的KYSE150细胞从-80°C或液氮中取出后，立即放入37°C水浴中解冻，持续1-2分钟，直到完全解冻。

• 解冻后迅速将KYSE150细胞转移到含10% FBS的RPMI-1640培养基中，并轻轻混匀。

• 将解冻后的KYSE150细胞悬液接种到T25培养瓶中，接种密度为1 x 10^5 - 2 x 10^5细胞/mL。

• 将培养瓶放入37°C、5% CO₂培养箱中静置培养。

KYSE150细胞换液与传代

• 每2-3天换液一次，即使培养基未变黄也要及时换液。

• 在换液时，轻轻倾斜培养瓶，使用巴氏吸管吸取上清液，避免KYSE150细胞脱落。

• 补充等体积的新鲜培养基以维持适宜的培养条件。

• 当KYSE150细胞生长至80%-90%汇合时，应进行传代，一般每3-4天进行一次。

• 用PBS缓冲液清洗KYSE150细胞，去除残留的培养基。

• 加入0.25%胰蛋白酶消化KYSE150细胞2-3分钟，观察细胞是否开始脱落。

• 加入等体积的培养基终止消化，轻轻吹打使KYSE150细胞充分分散。

• 将KYSE150细胞悬液转移到离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 重悬KYSE150细胞于新鲜培养基中，并按照1:4的比例接种到新培养瓶中。

注意事项

• 细胞敏感性：KYSE150细胞对氧气、细胞密度及营养条件极为敏感，需定期换液和传代，以避免细胞应激和死亡。

• 建议平放培养瓶，以增大空气交换面积，确保液体高度不超过3mm。

• 当KYSE150细胞碎片较多时，才进行离心清洗，避免过度吹打和离心对细胞造成损伤。

• 监测细胞状态：定期显微镜下观察KYSE150细胞的形态和生长情况，确保细胞维持在健康状态。

传代频率的调整

• 根据KYSE150细胞的生长状态和密度，传代频率可以适当调整：

• 正常生长：KYSE150细胞达到80%-90%汇合时进行传代，通常每3-4天传代一次。

• 快速生长：如果KYSE150细胞增殖较快，可缩短传代间隔至每2-3天一次。

• 慢生长：若KYSE150细胞生长缓慢，可延长传代时间，但不宜超过5天，以免KYSE150细胞过度密集导致死亡。