ECA109细胞系建立于1973年，源自中国一位患者的食管中段鳞状细胞癌组织。ECA109细胞系通过小块法原代培养的方法进行建立。具体操作是将肿瘤组织切割成小块，并在适宜的培养基中培养以促进细胞生长。

ECA109细胞特性特征

• 致瘤性：Eca109细胞确实在BALB/c裸鼠中具有致瘤性，能够形成肿瘤。

• 细胞周期：Eca-109细胞在接受不同药物（如芹菜素和苦参碱）处理后，细胞周期会发生变化。芹菜素能够使Eca-109细胞周期阻滞在S期，影响DNA合成，从而抑制细胞增殖并诱导凋亡。

• 凋亡特征：Eca-109细胞在药物处理后表现出明显的凋亡特征，包括细胞形态的变化和凋亡小体的形成。

• 基因表达：Eca-109细胞的基因表达特征与食管癌相关，涉及多个信号通路和基因的调控。

ECA109细胞参数表

ECA109人食管癌细胞培养教程

ECA109细胞复苏

• 配制完全培养基：RPMI-1640基础培养基中添加10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素混合抗生素，以适合ECA109细胞的生长。

• 将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度，以保证ECA109细胞的最佳复苏条件。

• 从液氮罐或-80℃冰箱中取出冻存的ECA109细胞，立即放入37℃的水浴中，快速摇动冻存管，使ECA109细胞迅速解冻（通常不超过1分钟）。

• 将解冻后的ECA109细胞悬液迅速移至15ml离心管中，加入5ml预热的完全培养基以稀释DMSO。

• 在1000rpm条件下离心5分钟，弃去上清液，保留ECA109细胞沉淀。

• 轻轻重悬ECA109细胞沉淀于2ml完全培养基中，并将ECA109细胞悬液转移至T25培养瓶，做好标记。

• 将培养瓶放置在37℃、5% CO₂的培养箱中孵育ECA109细胞。

• 24小时后，检查ECA109细胞是否贴壁；未贴壁的ECA109细胞可能已失活。

ECA109细胞传代

• 传代准备：当ECA109细胞在培养瓶内生长至80%-90%汇合度时，即可进行传代。

• 轻轻吸弃旧的培养基，用1ml无菌PBS清洗ECA109细胞一次，以去除残留的培养基。

• 加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液，放置在37℃培养箱中消化2-5分钟，期间观察ECA109细胞脱落情况。

• 当大部分ECA109细胞脱落时，立即加入2ml完全培养基终止消化作用，并轻轻吹打以悬浮ECA109细胞。

• 在1000rpm条件下离心5分钟，弃去上清液。

• 以2ml完全培养基重悬ECA109细胞，然后按1:3或1:5的比例将ECA109细胞分配至新的培养瓶中。

• 将新的培养瓶放回37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养ECA109细胞，直至ECA109细胞再度达到传代要求。

ECA109细胞冻存

• 冻存准备：配制冻存液：完全培养基中加入10%二甲基亚砜（DMSO）作为保护剂，以适应ECA109细胞的冻存需求。

• 当ECA109细胞状态良好且生长旺盛时，收集ECA109细胞并进行离心，弃去上清液。

• 用冻存液重悬ECA109细胞，将ECA109细胞浓度调整至1×10^6 cells/ml。

• 将ECA109细胞悬液分装至冻存管中，并标记清楚。

• 将ECA109细胞冻存管逐步降温至-80℃，然后移至液氮罐中长期保存ECA109细胞。

注意事项

• 培养基应现用现配，避免使用长时间存放的培养基，以保障ECA109细胞的培养质量。

• 在处理ECA109细胞时，应始终在超净工作台内进行操作，以减少ECA109细胞的污染风险。

• ECA109细胞复苏后，应在24小时内观察ECA109细胞状态，及时调整培养条件，确保ECA109细胞的最佳状态。