KYSE410细胞系是从一名51岁日本男性在治疗前因颈部食管切除的低分化侵袭性食管鳞状细胞癌（肿瘤明显侵入外膜）中建立。

KYSE410细胞系特征

• 过表达基因：过表达肝素结合生长因子（hst-1）和细胞周期蛋白D1。

• Y染色体：通过短串联重复序列（STR）-PCR分析，无法检测到Y染色体。这可能是SSC细胞系丢失Y染色体的已知现象。

• 细胞倍增时间：KYSE-410细胞的倍增时间为32-45小时。

• 支原体检测：初始污染通过环丙沙星（Ciprobay）消除，并在DAPI、微生物培养、RNA杂交和PCR检测中连续呈阴性。

• 病毒检测：ELISA检测逆转录酶为阴性，PCR检测结果均为阴性，包括EBV、HBV、HCV、HHV-8、HIV-1、HIV-2、HPV、HTLV-1/2、MLV、SMRV。

• 文献描述：KYSE410细胞系携带TP53和KRAS突变。

KYSE410细胞参数表

KYSE410人食管鳞癌细胞培养教程

KYSE-410细胞复苏

• 将含有1mL KYSE-410细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。

• 将解冻后的细胞悬液加入4-6mL培养基中混合均匀。

• 在1000RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液。

• 用1-2mL培养基重悬KYSE-410细胞，轻轻吹匀。

• 将细胞悬液加入培养瓶或10cm培养皿中，培养过夜。

• 第二天换液并检查KYSE-410细胞密度。

KYSE-410细胞传代

• 当KYSE-410细胞密度达80%-90%时，可进行传代培养。

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗KYSE-410细胞1-2次。

• 加入0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 在显微镜下观察KYSE-410细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10% FBS的培养基终止消化。

• 轻轻打匀后吸出KYSE-410细胞悬液，在1000RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液。

• 用1-2mL培养基重悬KYSE-410细胞，轻轻吹匀。

• 按1:2至1:5的比例分装到新的培养瓶或培养皿中，加入6-8mL完全培养基以保持KYSE-410细胞的生长活力。

• 后续传代根据实际情况按1:2至1:5的比例进行。

KYSE-410细胞冻存

• 传代时按照细胞传代的过程收集消化好的KYSE-410细胞到离心管中。

• 使用血球计数板计数，决定KYSE-410细胞的冻存密度（推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL）。

• 在1000RPM条件下离心3-5分钟，去掉上清。

• 用配制好的细胞冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬KYSE-410细胞。

• 按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

• 将冻存管置于程序降温盒中，在-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。

• 记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。